【摘 要】
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目的使用吲哚菁绿（Indocyanine green,ICG）作为光热转换剂,将ICG与可以结合人血清白蛋白并延长探针血液循环时间的伊文思蓝（Evans blue,EB）合成EB-ICG,再将EB-ICG与具有肿瘤靶向性的RGD多肽合成EB-ICG-RGD,制备出具有稳定良好光热效应与肿瘤靶向性的EB-ICG-RGD,验证其应用于肿瘤的光声显像与光热治疗效果。方法将ICG-NHS与EB-Mal偶联
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目的使用吲哚菁绿（Indocyanine green,ICG）作为光热转换剂,将ICG与可以结合人血清白蛋白并延长探针血液循环时间的伊文思蓝（Evans blue,EB）合成EB-ICG,再将EB-ICG与具有肿瘤靶向性的RGD多肽合成EB-ICG-RGD,制备出具有稳定良好光热效应与肿瘤靶向性的EB-ICG-RGD,验证其应用于肿瘤的光声显像与光热治疗效果。方法将ICG-NHS与EB-Mal偶联生成EB-ICG,然后将c（RGDfc）共价连接到EB-ICG得到EB-ICG-RGD。使用CCK-8法检测EB-ICG-RGD的细胞毒性;激光共聚焦与流式细胞术观察EB-ICG-RGD的细胞摄取;制备凝胶模型并使用小动物光声仪观察体外光声成像;使用红外相机记录并统计不同浓度EB-ICG-RGD经激光辐照产生的体外光热效应。建立4T1乳腺癌小鼠皮下移植瘤模型,对荷瘤小鼠注射EB-ICG-RGD后进行光声成像;随后将小鼠分为4组（n=4）,分别为生理盐水组,EB-ICG-RGD组,仅使用激光辐照组与注射EB-ICG-RGD后并使用激光辐照组,观察各组肿瘤体积变化与治疗后的肿瘤病理学变化。结果成功制备出EB-ICG-RGD。细胞毒性试验表明,10～50μg/ml浓度EB-ICG-RGD对细胞的毒性均较低;激光共聚焦与流式细胞术均显示出肿瘤细胞对EB-ICG-RGD的高摄取;在体外光声成像中,随着EB-ICG-RGD浓度的增加,其光声信号的强度也明显增加;不同浓度EB-ICG-RGD在激光辐照下也产生了明显的光热效应,并且随着浓度的增加,产生的光热效应也越发明显,说明EB-ICG-RGD具有应用于光热治疗的潜力。动物实验的结果也表明,在注射EB-ICG-RGD后小鼠肿瘤部位的光声信号在42小时达到了高峰。使用激光辐照小鼠肿瘤部位后,小鼠的肿瘤体积明显减小;从H＆E,TUNEL,PCNA与HSP70染色的结果来看,相较于其他组,注射EB-ICG-RGD后并经激光辐照的小鼠肿瘤部位出现了明显的坏死。结论EB-ICG-RGD对乳腺癌细胞与肿瘤具有良好的靶向性,在激光辐照下可以产生高温以实现光热治疗。
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