背景脑卒中因其高发病率、高致残率、高死亡率,对人类健康和生命安全产生了极大的危害。随着科学研究和临床实践的不断深入,脑卒中的防治策略也不断完善,但脑卒中的临床治疗中仍存在诸多难题,治疗时间窗窄,药物副作用大等问题亟待解决,因此亟需寻找新的治疗方法。缺血性脑卒中发生和发展的进程极为复杂,受多种因素影响,其中氧化应激反应是重要的病理生理过程。氧化应激是缺血后级联瀑布进程中重要的网络节点,引发脑血流量进一步降低,并攻击生物大分子,引起细胞坏死、自噬和凋亡。电针具有经济实用、简便易行、操作性强、副作用小等优点,易于被患者接受,适合应用于缺血性脑卒中的临床方案。电针预处理减少了丙二醛等的生成,激活体内的抗氧化系统。还可以提高线粒体呼吸链的功能和抗氧化能力,从而发挥神经保护效应。人参皂甙Rd是一种主要的人参皂甙单体提取物。离体试验和在体实验均证明人参皂甙Rd对缺血性脑损伤具有良好的治疗效果。人参皂甙Rd可通过直接清除活性氧、减轻自由基对细胞的损伤作用、有效抑制脑缺血过程中的过氧化反应发挥抗氧化作用。人参皂甙Rd具有较长的血浆半衰期。具有很高的脂溶性,能够透过生物膜,也能够透过血脑屏障到达中枢神经系统,使其显示出独特的临床应用潜力,但是人参皂甙rd只有在缺血后4h使用具有治疗效果,较短的治疗时间窗限制了其临床应用。因此本研究观察电针联合人参皂甙rd对减轻大鼠局灶性脑缺血损伤能否发挥协同作用,并探索其具体作用机制。实验一电针联合人参皂甙rd对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用目的:探讨电针联合人参皂甙rd对大鼠局灶性脑缺血损伤是否具有协同保护作用。方法:雄性sd大鼠64只,随机分为对照组(mcao组)、电针组(ea组)、人参皂甙rd6h组(gsrd6h组)、人参皂甙rd8h组(gsrd8h组)、人参皂甙rd10h组(gsrd10h组)、电针联合人参皂甙rd6h组(ea+gsrd6h组)、电针联合人参皂甙rd8h组(ea+gsrd8h组)、电针联合人参皂甙rd10h组(ea+gsrd10h组),每组8只。mcao组:建立大鼠mcao模型。ea组:造模成功后,在缺血即刻电针百会穴30min,电针参数为疏密波2/15hz,1-2ma。gsrd6h组:造模成功后,在缺血后6h给予gsrd50mg/kg腹腔注射。ea+gsrd6h组:造模成功后,在缺血即刻给予疏密波2/15hz,1-2ma电针百会穴30min,并在缺血后6h给予gsrd50mg/kg腹腔注射。gsrd8h组:造模成功后,在缺血后8h给予gsrd50mg/kg腹腔注射。ea+gsrd8h组:造模成功后,在缺血即刻给予疏密波2/15hz,1-2ma电针百会穴30min,并在缺血后8h给予gsrd50mg/kg腹腔注射。gsrd10h组:造模成功后,在缺血后10h给予gsrd50mg/kg腹腔注射。ea+gsrd10h组:造模成功后,在缺血即刻给予疏密波2/15hz,1-2ma电针百会穴30min,并在缺血后10h给予gsrd50mg/kg腹腔注射。神经功能学的评分在缺血再灌注后24h进行。评分后取大鼠脑组织,通过ttc染色计算出各组大鼠脑梗死容积百分比。结果:1)ea+gsrd6h组的神经行为学评分明显高于mcao组(p<0.05),脑梗死容积百分比明显低于mcao组(p<0.05)。gsrd6h组与mcao组相比则没有明显的统计学差异。2)ea+gsrd8h组的神经行为学评分明显高于mcao组(p<0.05),脑梗死容积百分比明显低于mcao组(p<0.05)。gsrd8h组与mcao组相比则没有明显的统计学差异。结论:对大鼠局灶性脑缺血损伤,电针联合人参皂甙rd具有协同保护作用。电针可以延长人参皂甙rd的治疗时间窗至缺血后8h。实验二电针联合人参皂甙rd的抗氧化作用的研究目的:探索电针联合人参皂甙rd的脑保护作用是否与调控抗氧化系统有关。方法:spf级雄性sd大鼠60只,随机分为假手术组(sham组)、局灶性脑缺血组(mcao组)、电针组(ea组)、人参皂甙rd组(gsrd组)、电针联合人参皂甙rd组(ea+gsrd组),每组12只。sham组:将右侧颈总、右侧颈外、右侧颈内动脉分离,但不插入线栓阻塞大脑中动脉。mcao组:建立大鼠mcao模型。ea组:造模成功后,在缺血即刻电针百会穴30min,电针参数为疏密波2/15hz,1-2ma。gsrd组:造模成功后,在缺血后8h给予gsrd50mg/kg腹腔注射。ea+gsrd组:建立大鼠mcao模型,在缺血即刻给予疏密波2/15hz,1-2ma电针百会穴30min,并在缺血后8h给予gsrd50mg/kg腹腔注射。其中每组大鼠各取4只在再灌注后24h后取材提取脑组织蛋白进行ros试剂盒和mda试剂盒检测。另取4只在再灌注后24h提取组织dna进行8-oh-dg试剂盒检测。每组剩余4只大鼠于再灌注后24h在深麻醉后取材,检测sod活力、cat活力和gsh含量。结果:1)与sham组相比,mcao组ros含量、mda的含量和8-oh-dg含量明显升高(p<0.05),与mcao组相比,ea+gsrd组ros含量、mda的含量和8-oh-dg含量降低(p<0.05)。2)与sham组相比,mcao组sod活性、cat活性和gsh含量明显下降(p<0.05),与mcao组相比,ea+gsrd组的sod活性、cat活性和gsh含量升高。(p<0.05)。结论:电针联合人参皂甙rd通过调节抗氧化系统,减轻氧化应激反应发挥神经保护作用。实验三电针联合人参皂甙rd的远期保护效应目的:探索电针联合人参皂甙rd对脑缺血再灌注损伤的远期保护效应。方法:1)雄性sd大鼠48只,随机分组,分为假手术组(sham组)、局灶性脑缺血组(mcao组)、电针联合人参皂甙rd组(ea+gsrd组),每组16只。sham组:将右侧颈总、右侧颈外、右侧颈内动脉分离,但不插入线栓阻塞大脑中动脉。mcao组:建立大鼠MCAO模型。EA+GSRd组:建立大鼠MCAO模型,在缺血即刻给予疏密波2/15Hz,1-2mA电针百会穴30min,并在缺血后8h给予GSRd 50mg/kg腹腔注射。于再灌注后1d、3d、7d、14d每组各取4只测定体重、脑组织含水量、脑指数。2)雄性SD大鼠16只,随机分为局灶性脑缺血组(MCAO组)和电针联合人参皂甙Rd组(EA+GSRd组),每组8只。MCAO组:建立大鼠MCAO模型。EA+GSRd组:建立大鼠MCAO模型,在缺血即刻给予疏密波2/15Hz,1-2mA电针百会穴30min,并在缺血后8h给予GSRd 50mg/kg腹腔注射。于再灌注后1d至7d每天测定神经行为学评分,在7d、14d进行神经功能学评分后取大鼠脑组织,通过TTC染色计算出各组大鼠脑梗死容积百分比。结果:与MCAO组比较,EA+GSRd组可以促进大鼠体重的恢复,明显降低脑指数,减少脑组织含水量,减少脑梗死容积百分比,增加神经功能学评分。结论:电针联合人参皂甙Rd对脑缺血再灌注损伤的有较好的远期保护效应。小结1.对大鼠局灶性脑缺血损伤,电针联合人参皂甙Rd具有神经保护的协同作用。电针可以延长人参皂甙Rd的治疗时间窗至缺血后8h。2.电针联合人参皂甙Rd通过调节抗氧化系统,减轻氧化应激反应发挥神经保护作用。3.电针联合人参皂甙Rd对于脑缺血再灌注损伤具有较好的远期保护效应。