微囊化兔雪旺细胞移植后脊髓半横断损伤大鼠血清MBP动态变化及组织学观察

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目的 观察大鼠脊髓半横断损伤后植入微囊化兔雪旺细胞(Schwann Cells,SCs)对血清髓鞘碱性蛋白(Myelin Basic Protein,MBP)变化的影响及组织学变化,初步探讨微囊化异种SCs移植治疗脊髓损伤(Spinal Cord injury,SCI)的修复机制及对髓鞘再形成的影响。 方法 取健康成年家兔10只,体重2200±200g;Sprague-Dawley(SD)大鼠142只,体重220±20g,雌雄不拘,随机分为4组:A组(单纯损伤组,n=44);B组(SCs移植组,n=44);C组(微囊化SCs移植组,n=44);D组(正常对照组,n=10)。无菌条件下取成年家兔双侧坐骨神经干,利用反复差速贴附法体外培养SCs,制备SCs细胞悬液及微囊化SCs细胞悬液。建立大鼠T10脊髓右半横断损伤模型,A、B、C组分别在损伤处移入吸附10μl的DMEM培养液、SCs悬液、微囊化SCs悬液的明胶海绵。D组为正常组。动物在灌注前,心脏穿刺采血,用ELISA法检测血清MBP。术后1d、3d、7d、14d、28d,各组每时相取8只(D组取2只)大鼠灌注固定,取损伤周围处脊髓组织做石蜡切片,行HE、Loyez氏法髓鞘染色。另外,A、B、C组2w、8w时相点各2只大鼠,取损伤周围处脊髓组织固定,Epon816包埋,醋酸铀和柠檬酸铝双染,超薄切片电镜观察。 结果 各组损伤后1d即出现血清MBP升高,7d达到高峰,以后逐渐恢复。移植后1d、3d各组间血清MBP水平差异无显著性(P>0.05)。移植后7d、14d、28d,与A、B组比较,C组血清MBP含量均较低(P<0.05),尤14d明显(P<0.01);A组与B组比较,除术后7d血清MBP含量比较差异有显著性(P<0.05)外,其他时相的比较差异无显著性(P>0.05)。SCI后1d、3d各组损伤侧脊髓神经元变性坏死,数量减少,部分神经元胞体皱缩、核固缩,细胞边界模糊,髓鞘数量减少、结构松驰,脊髓组织内片状出血,出血周围可见神经胶质细胞和巨噬细胞浸润,但B组和C组较少见。7d时坏死区有胶质细胞增生和白细胞浸
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