流式细胞检测及TUNEL卖验结果显示,与对照组相比,WP1066或hSTAT3抑制STAT3联合照射组明显增加U251细胞的凋亡；4、GFP-LC3凝集簇实验结果显示：WP1066联合照射或shSTAT3联合照射均较单纯照射组绿色荧光凝集簇增加；5、western blot结果显示药物或基因抑制STAT3均可引起凋亡相关蛋白cleaved caspase 3、cleaved PARP1及自噬相关蛋白Beclin 1、ATG5、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达的上调。(三)进一步研究下调STAT3联合电离辐射介导的细胞自噬性质,分别予药物3-MA及siATG5抑制自噬。1、克隆形成实验结果：与对照组或单纯抑制STAT3组相比,3-MA或siATG5联合抑制STAT3可明显增加U251细胞的放射敏感性,同时,si-ATG5联合shSTAT3可明显增加A172细胞的放射敏感性；2、Annexin Ⅴ-PE流式细胞检测U251细胞凋亡结果提示,与各自对照组或抑制STAT3联合照射组相比,抑制自噬、STAT3联合照射组U251细胞凋亡率明显升高；3、GFP-LC3凝集簇实验显示,WP1066、抑制自噬联合电离辐射组可明显减少U251细胞内绿色凝集素的形成；4、Western blot实验结果显示,抑制STAT3及自噬联合照射,可明显增加U251内凋亡及自噬相关蛋白表达的上调。结论：4、8Gy X射线可明显增加U251细胞凋亡、自噬以及细胞内STAT3蛋白水平磷酸；WP1066或shSTAT3抑制STAT3联合X射线可明显降低细胞内p-STAT3表达水平,同时增加U251细胞凋亡与保护性自噬；予3-MA或siATG5抑制自噬,可明显降低U251细胞保护性自噬,介导更多细胞走向凋亡途径,从而增加U251、A172细胞的放射敏感性。