阿尔泰金莲花浸膏粉对PM2.5致大鼠急性肺伤保护作用的研究

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目的:研究阿尔泰金莲花浸膏粉(Trollius altaicus extract powder,TAEP)对PM2.5致大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的保护作用。方法:(1)采用限量法进行TAEP初步安全性评价。选取SPF级昆明种小鼠20只,雌雄各半,体质量1822g,随机分两组,即溶剂对照组、TAEP组,TAEP以10g/kg剂量按0.35ml/10g体积进行一次性灌胃给药,给药后,观察14d,记录动物所出现的毒性反应,统计各组动物死亡情况。若观察期间内无动物死亡,可判定其急性毒性分级为安全无毒;若观察期间内出现动物死亡,则选择寇氏法继续进行TAEP安全性评价。(2)将60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、模型+TAEP低、中、高剂量组和地塞米松阳性对照组(2 mg/kg),共6组,每组10只。除正常对照组、模型组灌胃给予蒸馏水外,其余各组分别按相应剂量灌胃给予受试物30天(阳性对照组灌胃29天),实验第30天,阳性对照组在造模前1小时灌胃给予地塞米松(2 mg/kg)。除正常对照组外,其余各组均行气管滴注PM2.5悬液14 mg/kg,造成大鼠急性肺损伤。造模3h后,经腹主动脉取血,取全血进行白细胞分类及计数,分离血清检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;取大鼠左肺行肺泡灌洗,并收集肺泡灌洗液,检测其中IL-6、IL-1β、TNF-α的含量;取大鼠右肺下叶称取质量后计算肺湿/干重比(W/D),右肺上叶作病理组织学检查。结果:(1)TAEP初步安全性评价给药观察14天中,动物未出现呕吐、嗜睡及其他中毒症状,体重增长无异常,确定TAEP的毒性分级为安全无毒。(2)与正常对照组比较,模型组大鼠白细胞、计淋巴细胞及中性粒细胞计数均升高(P<0.01),血清和BALF中IL-6、IL-1β、TNF-α含量均升高(P<0.01),血清中SOD和GSH含量降低(P<0.01),LDH、MDA、NO含量升高(P<0.01),肺组织W/D升高(P<0.01);与模型组比较,模型+TAEP各剂量组白细胞、淋巴细胞及中性粒细胞计数,血清和BALF中IL-6、IL-1β、TNF-α含量降低(P<0.05或P<0.01),血清中SOD和GSH含量升高(P<0.05或P<0.01),LDH、MDA、NO含量降低(P<0.05或P<0.01),肺组织W/D降低(P<0.05或P<0.01);模型+TAEP高剂量组各项检测指标与地塞米松组接近(P<0.05);病理检查结果显示随TAEP剂量增加大鼠肺泡形态结构破坏降低,水肿及炎症细胞浸润减少,高剂量组大鼠肺脏可见少量炎性细胞浸润,肺泡及各级支气管均结构完整,与地塞米松阳性对照组相近。结论:初步安全性评价实验确定TAEP的急性毒性分级为安全无毒;TAEP可通过清除自由基,降低脂质过氧化反应及自身免疫调节作用对PM2.5致大鼠急性肺损伤发挥较好的预防保护作用。
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