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目的：应用人羊膜上皮细胞（human amniotic epithelial cells，hAECs）或人羊膜上皮细胞的培养上清(conditioned medium collectedfrom cultured hAECs， hAEC-CM)治疗白消安和环磷酰胺（Busulfan andcyclophosphamide,Bu/Cy）所致卵巢损伤（primaryovarian insufficiency，POI）的小鼠模型，观察其治疗效果。同时，初步探讨hAECs修复POI小鼠卵巢功能的可能机制。 方法：获取孕有男性胎儿的剖宫产孕妇的胎盘羊膜并从中分离hAEC s；将其分为两部分，第一部分hAECs持续培养，第二部分hAECs则待其铺展至80-90％密度时，将含血清培养基换成无血清培养基，继续培养24h后收集hAECs-CM并进行浓缩；将C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、Bu/Cy组、Bu/Cy+hAECs(24h)组、Bu/Cy+hAECs-CM(24h)组、Bu/Cy+hAECs(7d)组和Bu/Cy+hAECs-CM(7d)组共6组。其中正常对照组，不给予任何处理，其余5组则采用腹腔注射化疗药物白消安和环磷酰胺制作POI小鼠模型。其中Bu/Cy组不经任何治疗处理，Bu/Cy+hAECs(24h)组于化疗24小时后进行腹腔移植hAECs，Bu/Cy+hAECs-CM(24h)组于化疗24小时后进行腹腔注射hAECs-CM，Bu/Cy+hAECs(7d)组于化疗7天后进行腹腔移植hAECs，Bu/Cy+hAECs-CM(7d)组于化疗7天后进行腹腔注射hAECs-CM。四个治疗组均于第一次治疗后的第二天加强注射一次，共注射两次。比较各组小鼠体重、卵巢组织形态学、各级卵泡数量以及交配实验等结果的差异，评估hAEC s和hAECs-CM对POI小鼠损伤卵巢的治疗效果。同时，通过巢氏PCR(multiplex nested PCR)检测移植hAECs后小鼠卵巢中是否表达人来源的Y染色体性别决定基因(sex-determining region of Y-chromosome，SRY)。最后分别于化疗或治疗后2周或者1个月检测各组小鼠卵巢组织中VEGFA(Vascular endothelial growth factor A)及其受体VEGFR1(Vascular endothelial growth factorreceptor1,也称为FMS-like tyrosine kinase1，FLT1)和VEGFR2(Vascular endothelial growth factor receptor2，kinase insert domainprotein receptorkinase insert domainprotein receptor，KDR)的表达情况以及微血管数量的变化。 结果：1.成功地构建了白消安+环磷酰胺诱导的POI小鼠模型;2.腹腔移植hAECs或腹腔注射hAECs-CM对POI小鼠进行治疗后，HE染色结果显示POI小鼠各级卵泡数量均得到增加，交配后单胎子代小鼠数量增加；3.化疗后24小时移植hAECs的POI小鼠卵巢内可以检测到人来源的SRY基因的表达，而化疗后7天移植hAECs的小鼠卵巢内没有检测到人来源的SRY基因的表达；4.Real-time PCR分析结果显示化疗后2周Bu/Cy组小鼠卵巢组织中VEGFR1和VEGFR2的表达降低，VEGFA的表达升高。而腹腔移植hAECs或hAECs-CM后小鼠卵巢VEGFR1和VEGFR2表达升高，且免疫组织化学分析结果与Real-time PCR结果相似；5.化疗后1个月免疫组织化学分析结果表明Bu/Cy组小鼠卵巢组织VEGFA、VEGFR1和VEGFR2的表达均降低，而腹腔移植hAECs或hAECs-CM的小鼠其卵巢组织中VEGFA及其受体的表达均增加。5.化疗后2周或1个月，卵巢组织中微血管数量均较正常对照组明显减少，而腹腔移植hAEC s或hAEC s-C M的小鼠其卵巢中微血管数量则较Bu/Cy组小鼠明显增加。 结论：腹腔移植hAECs或腹腔注射hAECs-CM均对Bu/Cy化疗所致POI小鼠的卵巢功能有部分修复作用，化疗后24h给予治疗的小鼠其卵巢功能改善效果较化疗后7d给予治疗的小鼠为佳，且 hAECs-CM对卵巢的修复作用与腹腔移植hAECs的修复效果相当。此外hAECs和hAECs-CM治疗后1个月小鼠卵巢中的VEGFA和其受体VEGFR1和VEGFR2的表达均较未治疗的Bu/Cy组小鼠增加，微血管数量也明显增高，表明 hAECs可能是通过分泌一些因子进行旁分泌调节血管生成进而有效改善卵巢功能。