目的：静脉畸形(venous malformation, VM),过去被称为海绵状血管瘤,属于一种低流速脉管畸形,局部由的扩张的静脉构成,约40%发生于头颈部,不仅影响面容,若压迫、侵及邻近组织结构,会影响语言、吞咽和呼吸等功能,严重者有窒息死亡的危险。其治疗方法众多,现代医学主张根据患者的具体病情,选择合适的治疗手段。平阳霉素(pingyangmycin, PYM)硬化治疗是目前最常用的方法之一,但由于面颈部血管交通丰富,静脉回流快,单纯应用平阳霉素在病灶部位停留时间短,造成使用剂量大,而产生副作用的风险也增大。为了减缓平阳霉素的吸收,使其在注射病灶内较长时间维持有效浓度,而又不增加平阳霉素的注射总量,控制其副作用,我们需要选用一种合适的药物缓释剂。透明质酸(hyaluronic acid, HA),一种广泛存在于动物和人体的生理活性物质,在人皮肤、关节滑膜液、脐带、房水及眼玻璃体中均有分布,是一种可天然降解、可吸收的生物医学材料,它具有高粘弹性、可塑性、渗透性、独特的流变学特性以及良好的生物相容性等,被广泛应用于药物缓释领域。同时,其在细胞增殖、迁移、血管生成、肿瘤发生等过程中都起着重要作用。因此,我们将目光聚焦于透明质酸,以其联合平阳霉素,探索两者联合应用对静脉畸形治疗的效果。组织学上,静脉畸形由衬有内皮细胞的无数血窦组成,由此我们以培养自人静脉畸形组织的静脉畸形内皮细胞(human vascular malformation endothelial cells, HVMECs)作为研究模型,通过联合应用平阳霉素和透明质酸的钠盐(透明质酸钠)对其进行处理,观察其在细胞增殖、血管生成、凋亡方面的表现,以研究联合应用平阳霉素和透明质酸钠对静脉畸形的治疗效果,并对其机制进行探讨。材料与方法：用组织块培养的方法培养静脉畸形内皮细胞,倒置相差显微镜下观察所培养细胞的生长情况和形态特征,用内皮细胞特异性抗原兔抗人vWF(1：150)和兔抗人CD34(1:150)进行鉴定。用MTT比色法描记细胞生长曲线的变化,筛选平阳霉素和透明质酸钠作用于静脉畸形内皮细胞的最佳浓度。按照所确定的最佳药浓度,将所培养的细胞分别用透明质酸钠、平阳霉素、平阳霉素联合透明质酸钠进行处理,用MTT比色法检测药物对静脉畸形内皮细胞增殖的影响,用Tubeformation法观测药物对静脉畸形内皮细胞成血管能力的影响,用TUNEL试剂盒,检测药物对静脉畸形内皮细胞凋亡的影响。结果：组织块法培养的细胞vwf、CD34染色呈阳性表达,证实所培养细胞为静脉畸形内皮细胞。用透明质酸钠、平阳霉素单独作用于静脉畸形内皮细胞时,最佳有效浓度分别为4OOug/ml、10μg/ml。 MTT比色法显示透明质酸钠联合平阳霉素能更加有效抑制静脉畸形内皮细胞的增殖。Tube formation观测药物作用后静脉畸形内皮细胞成血管能力改变,结果显示平阳霉素联合透明质酸钠作用较单独应用平阳霉素细胞成血管能力下降,且成管持续时间减短,管壁消退快,与空白对照组相比有明显差异。用TUNEL试剂盒观测药物作用后静脉畸形内皮细胞凋亡能力改变,结果显示平阳霉素联合透明质酸钠作用较单独应用平阳霉素凋亡加剧,与空白对照组相比有显著差异。结论：我们的研究结果显示组织块细胞培养法可成功的培养静脉畸形内皮细胞。联合平阳霉素和透明质酸钠作用于静脉畸形内皮细胞后,与单独应用平阳霉素相比较,静脉畸形内皮细胞的增殖及成血管能力降低,凋亡增强。联合应用平阳霉素和透明质酸钠能显著地改变静脉畸形内皮细胞的增殖、凋亡、成血管能力,诱发静脉畸形的消退,联合两者用药,可能对临床上静脉畸形的治疗带来新的契机。