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目的:通过观察中药灸贴贴敷“脾俞”结合电针“曲池”、“足三里”对自发性高血压大鼠的干预效果以及对MAPKs途径相关蛋白的影响,从MAPKs途径的角度部分揭示中药灸贴贴敷结合电针对自发性高血压大鼠的干预作用机制,为临床“从脾论治”高血压病提供一定的实验依据。材料与方法:1.实验动物:SPF级,雄性,14周龄,体重220g～250g,自发性高血压大鼠（SHR）32只和京都种大鼠（WKY）8只。WKY大鼠为空白组;按照随机数字表法将SHR大鼠分为:模型组、针药灸贴组、灸贴组以及电针组,每组8只。2.干预方法针药灸贴组:固定器固定大鼠,电针双侧“足三里”、“曲池”穴,采用疏密波,频率4Hz/20Hz,日1次,每次20 min,连续15天。灸贴贴敷于大鼠双侧“脾俞”穴,6小时后去除,日1次,连续15天。电针组:固定器固定大鼠,电针双侧“足三里”、“曲池”穴,采用疏密波,频率4Hz/20Hz,日1次,每次20 min,连续15天。灸贴组:固定器固定大鼠,灸贴贴敷大鼠双侧“脾俞”穴,6小时后去除,日1次,连续15天。空白组和模型组:固定器固定大鼠,日1次,不予任何干预,连续进行15天。3.灸贴用药天麻、牛膝、钩藤、石决明、栀子、杜仲、黄芩、益母草、桑寄生、夜交藤、茯神姜汁。4.检测指标（1）大鼠尾动脉血压（收缩压、舒张压）测量:实验开始前1天及实验开始后的第1、3、5、7、9、11、13天上午测量大鼠收缩压、舒张压。（2）采用ELISA法检测各组大鼠血清中ET-1、NO含量。（3）大鼠心脏组织HE染色:观察各组大鼠心肌组织病理变化。（4）采用超声心动评价各组大鼠左心室结构及功能。（5）采用Western blot方法检测各组大鼠心脏组织p38-MAPK、p-p38-MAPK、ERK1/2、p-ERK1/2、JNK、p-JNK蛋白含量表达水平。（6）采用免疫组化法染色法观察大鼠心脏组织p-p38-MAPK、p-ERK1/2以及p-JNK蛋白的表达。（7）采用qPCR检测大鼠心脏组织p38-MAPK、ERK1/2、JNK mRNA表达水平。5.统计学处理采用SPSS 22.0软件分析系统进行统计学分析,数据用均数±标准差（x±s）表示,组间比较采用单因素方差分析,组间方差齐采用LSD检验,方差不齐采用Tamhane’s T2（M）检验。P<0.05被认为差异具有统计学意义。结 果:1.各组大鼠治疗前后血压情况分析实验前,模型组、针药灸贴组、电针组、灸贴组4组高血压大鼠血压明显高于空白组。实验后3天内大鼠血压变化不大;实验第5天,针药灸贴组、电针组、灸贴组血压均低于模型组,其中灸贴组降压最为明显;自第实验第7天起,针药灸贴组、电针组、灸贴组均持续降压,针药灸贴组降压效果显著且血压低于灸贴组及电针组。2.各组大鼠血清ET-1、NO含量比较与空白组比较,模型组、针药灸贴组、电针组、灸贴组的ET-1含量均显著升高,NO含量显著降低（P<0.05）。与模型组相比较,经过电针及灸贴干预后,针药灸贴组、电针组、灸贴组的ET-1含量均降低,相反,各组NO含量显著升高（P<0.05）。与针药灸贴组比较,电针组、灸贴组的ET-1含量均升高,而NO含量均降低（P<0.05）。3.各组大鼠心肌组织病理检查变化与空白组相比,模型组大鼠心肌细胞肥大明显,肌纤维排列紊乱,炎性细胞浸润明显,血管壁存在增厚;针药灸贴组较模型组,心肌纤维排列较为整齐,炎性细胞明显减少,血管壁增厚明显改善;电针组大鼠的心肌纤维排列紊乱,血管壁略增厚,炎性细胞浸润略有改善;灸贴组改善不明显。4.各组大鼠左心室结构及功能的变化与空白组相比,其他组大鼠的心重/体重比（HW/BW）、左室重量指数（LVWI）显著升高（P<0.05）,提示SHR出现心肌肥厚的表现。电针组及针药灸贴组可以显著地抑制SHR组HW/BW和LVWI的升高幅度（P<0.05）,表明电针组及针药灸贴组可有效抑制SHR心肌肥厚表现,针药灸贴组改善高血压心肌肥厚效应更明显。与空白组相比,模型组大鼠的左室射血分数（LVEF）显著降低（P<0.05）,提示SHR心功能减弱。针药灸贴组和电针组大鼠LVEF较模型组均有升高（P<0.05）,针药灸贴组的LVEF升高的更为明显。5.各组大鼠心脏组织p38-MAPK、p-p38-MAPK蛋白表达的变化与空白组相比,其余4组大鼠心脏组织p38-MAPK、p-p38-MAPK蛋白表达均明显上调（P<0.05）;针药灸贴组、电针组大鼠心脏组织p38-MAPK、p-p38-MAPK蛋白表达明显低于模型组（P<0.05）,但灸贴组与模型组相比无显著性差异;针药灸贴组心脏组织p38-MAPK、p-p38-MAPK蛋白表达低于电针组和灸贴组（P<0.05）。6.各组大鼠心脏组织ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达的变化与空白组相比,模型组、针药灸贴组、电针组以及灸贴组大鼠心脏组织ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达均明显上调（P<0.05）;较模型组,针药灸贴组、电针组、灸贴组大鼠心脏组织p-ERK1/2蛋白表达均显著下降（P<0.05）;但灸贴组大鼠心脏组织ERK1/2蛋白表达与模型组相比无显著性差异,针药灸贴组和电针组低于模型组（P<0.05）;针药灸贴组心脏组织ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达均低于电针组和灸贴组（P<0.05）7.各组大鼠心脏组织JNK、p-JNK蛋白表达的变化与空白组相比,模型组、针药灸贴组、电针组以及灸贴组大鼠心脏组织JNK、p-JNK蛋白表达均明显上调（P<0.05）;较模型组,针药灸贴组、电针组以及灸贴组大鼠心脏组织JNK、p-JNK蛋白表达均无显著性差异。8.各组大鼠心脏组织p-p38-MAPK、p-ERK1/2以及p-JNK蛋白表达的阳性密度免疫组化染色显示,与空白组相比,模型组、针药灸贴组、电针组以及灸贴组大鼠心脏组织p-p38-MAPK、p-ERK1/2以及p-JNK蛋白表达的阳性密度均明显增高（P<0.05）;针药灸贴组、电针组大鼠心脏组织p-p38-MAPK蛋白表达的阳性密度低于模型组（P<0.05）,灸贴组与模型组相比无显著性差异;较模型组,针药灸贴组、电针组以及灸贴组大鼠心脏组织p-ERK1/2蛋白表达的阳性密度显著下降（P<0.05）;针药灸贴组心脏组织p-p38-MAPK蛋白表达的阳性密度低于电针组和灸贴组（P<0.05）;针药灸贴组、电针组以及灸贴组大鼠心脏组织p-ERK1/2蛋白表达的阳性密度无显著性差异;较模型组,针药灸贴组、电针组以及灸贴组大鼠心脏组织p-JNK蛋白表达的阳性密度均无显著性差异。9.各组大鼠心脏组织p38-MAPK mRNA表达的变化模型组、针药灸贴组、电针组以及灸贴组大鼠心脏组织p38-MAPK mRNA表达较空白组均显著上调（P<0.05）;针药灸贴组、电针组大鼠心脏组织p38-MAPK mRNA表达明显低于模型组（P<0.05）,但灸贴组与模型组相比无显著性差异;针药灸贴组心脏组织p38-MAPK mRNA的表达低于电针组和灸贴组（P<0.05）。10.各组大鼠心脏组织ERK1/2 mRNA表达的变化模型组、针药灸贴组、电针组以及灸贴组大鼠心脏组织ERK1/2 mRNA表达较空白组均显著上调（P<0.05）;与模型组相比,针药灸贴组、电针组以及灸贴组大鼠心脏组织ERK1/2 mRNA表达有所降低（P<0.05）;针药灸贴组心脏组织ERK1/2 mRNA的表达低于电针组和灸贴组（P<0.05）。11.对大鼠心脏组织JNK mRNA表达的影响与空白组相比,模型组、针药灸贴组、电针组以及灸贴组大鼠心脏组织JNK mRNA表达均明显上调（P<0.05）;较模型组,针药灸贴组、电针组以及灸贴组大鼠心脏组织JNK mRNA表达均无显著性差异。结 论:1中药灸贴贴敷结合电针能显著降低自发性高血压大鼠血压2中药灸贴贴敷结合电针能降低自发性高血压大鼠血管内皮损伤针药灸贴组大鼠通过降低ET-1含量、升高NO含量,有效降低血管内皮细胞损伤,起到对血管的保护作用,并有利于血管平滑肌舒张,对机体血压起到一定的调节作用。3中药灸贴贴敷结合电针能改善高血压大鼠心肌及左心功能通过HE染色观察发现,针药灸贴组心肌纤维排列较为整齐,炎性细胞明显减少,血管壁增厚明显改善;通过超声心动评价各组大鼠左心室结构及功能发现,灸贴结合电针能够有效的改善高血压大鼠心肌肥厚的程度及左心功能,能减少由于高血压病对靶器官的影响。4基于MAPKs途径初步揭示中药灸贴贴敷结合电针对高血压病干预作用机制中药灸贴贴敷“脾俞”结合电针“曲池”、“足三里”对高血压病干预作用可能是通过降低p38-MAPK、ERK磷酸化,抑制p38-MAPK、ERK活化,有效抑制诱导心肌细胞肥大的p38-MAPK、ERK通路被激活,从而起到对高血压病干预作用;针药灸贴对高血压病而非是通过JNK信号通路起到干预作用。