糖尿病患者ECFC和高糖高脂诱导下HUVEC Slit/Robo表达的变化

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目的:观察糖尿病患者内皮克隆形成细胞(ECFC) Slit/Robo表达的变化。方法:收集糖尿病患者及健康成人空腹静脉外周血,密度梯度离心法分离单个核细胞,EGM-2培养基培养至形成克隆细胞集落,流式细胞术检测细胞表型,分离、鉴定并计数其高、中、低克隆集落,real-time PCR检测Slit/Robo mRNA的表达。结果:(1)ECFC CD31表达率高达99.24%,CD45和CD14均为阴性,提示ECFC分离培养成功;(2)糖尿病患者ECFC的高克隆细胞集落所占比例低于健康成人(p<0.05);(3)糖尿病患者ECFC Slit2、 Slit3、Robo1、Robo4mRNA的表达分别为健康成人的0.12、0.49、0.19,0.11倍,其中Slit2和Robo4mRNA表达的下调最为显著(p<0.05)。结论:与健康成人相比,糖尿病患者ECFC增殖能力减弱,Slit2、Robo4的表达也明显降低。图7个,参考文献32篇。摘要目的:观察高糖高脂诱导下人脐静脉内皮细胞(HUVEC) Slit/Robo表达的变化。方法:RPMI1640培养基培养HUVEC,分对照组和高糖组分别培养1、2、3、5、7天, real-time PCR和Western blot检测Slit/Robo mRNA和蛋白的表达;分对照组和高脂组,分别用含0、50、125.250μmol/L棕榈酸的RPMI1640培养基培养HUVEC48h, real-time PCR检测Slit/Robo mRNA的表达。结果:(1)高糖诱导下HUVEC Slit2、Slit3、Robo4mRNA的表达升高,以高糖干预的第2、3、5天升高较为明显;(2)高糖诱导下HUVEC Slit2、Slit3、 Robo4蛋白的表达升高,其中Slit3、Robo4第2、3、5天升高较明显,Slit2第2、3、5、7天升高较明显;(3)高脂诱导下HUVEC Slit2、Slit3、Robo1mRNA的表达在125μmol/L浓度组是升高的,Robo4mRNA表达在250μmol/L浓度组是升高的。结论:高糖干预HUVEC可促进HUVEC Slit2、Slit3、Robo4表达的增高;高脂干预HUVEC可促进HUVEC Slit2、Slit3、Robo1、 Robo4表达的增高。图14个,参考文献32篇。
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