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目的:通过高通量测序技术,探讨影响婴儿肠道微生物群初始定植和动态演替的因素,为生命早期益生菌干预,及早建立肠道微生态平衡提供理论依据。方法:选择2016年10月-2018年1月在河北医科大学第三医院和石家庄市第四医院出生的符合入组标准的新生儿106例,随访其生后第1、3、7天,第1个月、3个月和第6个月龄时的喂养情况及用药情况,并收集上述时间点的粪便标本,提取粪便标本中DNA,采用HiSeq2500 PE250高通量测序平台对细菌16S rRNA的V4可变区域进行测序,所得数据进行生物信息学分析。结果:1标本基本信息符合入组条件婴儿106例,其中阴道分娩儿57例,剖宫产儿49例,分别于生后第1、3、7天,第1个月、3个月和第6个月龄时收集婴儿粪便标本。应收标本636个,实际收集547个,因婴儿患病或使用药物等原因脱落89个,脱落率14.00%,其中42个标本提取DNA失败,54个标本扩增失败,最终451个样本进入后续测序分析。2对婴儿胎便微生物群的影响2.1分娩方式:阴道分娩儿和剖宫产儿胎便微生物群在物种多样性上没有统计学差异。2.2门水平上,阴道分娩儿胎便中拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)相对丰度较高,剖宫产儿胎便中厚壁菌门(Firmicutes)相对丰度较高;属水平上,阴道分娩儿胎便中拟杆菌属(Bacteroides)、普氏菌属(Prevotella)、肠球菌属(Enterococcus)等较高,剖宫产儿胎便中微杆菌属(Microbacterium)、节杆菌属(Arthrobacter)、丙酸菌属(Propionibacterium)、芽孢杆菌属(Bacillus)、沙门氏菌属(Salmonella)等较高。3对婴儿肠道微生物群多样性的影响3.1整体水平阴道分娩儿肠道微生物群多样性高于剖宫产儿。3.2对于阴道分娩儿,喂养方式对其肠道微生物群多样性影响不大。3.3对于剖宫产儿,益生菌奶粉喂养儿肠道微生物群多样性高于纯母乳或混合喂养儿。3.4对于剖宫产儿,益生菌奶粉喂养儿肠道微生物群多样性随年龄增加而逐渐增大;母乳和混合喂养儿肠道微生物群多样性随年龄的变化趋势不明显。4对婴儿肠道Top10微生物群的影响4.1整体水平上,婴儿肠道中乳杆菌属(Lactobacillus)和双歧杆菌(Bifidobacterium)随年龄增加逐渐升高;乳球菌属(Lactococcus)、芽孢杆菌属(Bacillus)和不动杆菌属(Acinetobacter)随年龄增加而逐渐降低。4.2剖宫产儿肠道中芽孢杆菌(Bacillus)、梭菌属(Peptoclostridium)高于阴道分娩儿,拟杆菌属(Bacteroides)低于阴道分娩儿;益生菌奶粉喂养后能降低其芽孢杆菌(Bacillus)、梭菌属(Peptoclostridium)丰度,但对拟杆菌属(Bacteroides)的调节作用不明显。4.3与母乳和混合喂养儿相比,益生菌奶粉喂养儿肠道中肠杆菌属(Enterobacter)和链霉菌属(Streptomyces)较高,乳球菌属(Lactococcus)和假单胞菌(Pseudomonas)较低。5对婴儿肠道微生物群演替的影响5.1分娩方式对婴儿肠道微生物群的影响随年龄增长而减小。5.2喂养方式对婴儿肠道微生物群的影响随年龄增长而减小。5.3在生后第6个月时不同分娩方式或喂养方式婴儿肠道微生物群的差异有所增加。结论:1.分娩方式、喂养方式是影响婴儿肠道微生物群初始定植和演替的重要因素。2.新生儿出生时的胎便存在微生物群,分娩方式是影响其定植的重要因素。3.阴道分娩儿肠道微生物群的多样性高于剖宫产儿,并持续至生后第6个月,分娩方式对肠道微生物群的影响随年龄增长而逐渐减小。4.喂养方式对婴儿肠道微生物群的影响随年龄增长而逐渐减小。5.生命早期益生菌干预能修饰婴儿肠道微生物群结构,使其模仿或接近母乳喂养儿,促使肠道微生态平衡的早期建立。