论文部分内容阅读
目的:探讨功能性纳米材料C60对APP/PS1阿尔茨海默病小鼠空间记忆的影响及相关分子机制的研究。方法:选取七个月龄APP/PS1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠。实验组(C60)给于连续10天腹腔注射浓度为40ug/ml的功能性纳米材料C60(460ug/kg);对照组(NS)给于连续10天腹腔注射相同体积的生理盐水。待小鼠恢复两天后,实验组和对照组小鼠平分两组,一组随即处死用于后续的免疫印迹法检测海马内总体(Total)、胞液部分(S)、突触小体(P1)上以及突触膜(P2)上Ca MKIIα、Ca MKIIβ以及P-Ca MKII水平;另外一组进行连续5天的Morris水迷宫训练实验和第6天的探索实验。提取野生型乳鼠进行海马原代神经元培养,待细胞生长7天之后分A、B、C、D组;A组接受PBS处理;B组接受C60处理(0.2ug/ml)、C组接受Aβ处理(1umol/L);D组同时接受Aβ和C60处理。处理3天之后利用免疫荧光法检测各组突触上Ca MKII蛋白水平的变化。结果:行为学结果:C60组小鼠第3、4、5天的逃避潜伏期小于NS组小鼠;但第1、2天两组小鼠逃避潜伏期没有差异。第6天的探索实验结果C60组小鼠其穿台次数和目标象限停留时间都大于NS组;两组小鼠游泳速度没有差异。蛋白印记结果:C60组相对于NS组Total部分Ca MKIIα、Ca MKIIβ以及P-Ca MKII蛋白水平没有差异;S部分NS组Ca MKIIα、P-Ca MKII水平高于C60组,Ca MKIIβ水平低于C60组;P1部分NS组Ca MKIIα、P-Ca MKII水平高于C60组,Ca MKIIβ水平低于C60组;P2部分NS组Ca MKIIα、P-Ca MKII水平低于C60组,Ca MKIIβ水平较C60组没有差异。免疫荧光结果:A组较B组突触上Ca MKII蛋白水平没有差异;C组较A组和B组其突触上Ca MKII蛋白水平明显减少;D组较C组其突触上Ca MKII蛋白水平明显提高。结论:功能性纳米材料C60可以提高APP/PS1阿尔茨海默病模型小鼠的空间记忆;功能性纳米材料C60减少了APP/PS1阿尔茨海默病小鼠海马胞液和突触小体上Ca MKIIα、P-Ca MKII水平,提高了突触膜上Ca MKIIα、P-Ca MKII水平以及胞液和突触小体上Ca MKIIβ的水平;功能性纳米材料C60可以改善Aβ对野生型小鼠海马原代神经元突触上Ca MKII蛋白的减少作用。