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本试验采用传统的细菌分离方法及生化鉴定从我区的5个规模化猪场采集来的266份断奶仔猪的鼻拭子中,分离到80株多杀性巴氏杆菌(Pm),并且运用豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验检测出其中产毒素多杀性巴氏杆菌(DNT+Pm)9株,分别命名为DNT+Pm—A、DNT+Pm—B、DNT+Pm—C、DNT+Pm—D、DNT+Pm—E、DNT+Pm—F、DNT+Pm—G、DNT+Pm—H、DNT+Pm—Ⅰ。并通过对9株DNT+Pm所对应的9头猪的鼻部横断面检查证实这9株DNT+Pm确为引起萎鼻的病原菌。经改良Carter氏法初步鉴定其中的DNT+Pm—C株为荚膜A型DNT+Pm。最后将DNT+Pm—C株送广西区防检站用API细菌自动化生化鉴定仪鉴定后确为Pm。应用单克隆抗体(McAb)技术,将灭活后荚膜A型的DNT+Pm—C株免疫BALB/C小鼠,取免疫鼠脾细胞与SP2/0进行细胞融合,经间接ELISA法筛选,有限稀释法克隆3次,最终获得3株稳定分泌抗DNT+Pm—C抗体的McAb杂交瘤细胞株,分别命名为2D1E8、4A11B2、7E3G9,并接种小鼠腹腔生产McAb腹水,间接ELISA测其效价为1∶1600至1∶12800不等。这3株McAb在-80℃超低温下保存3个月后复苏仍然能够稳定分泌抗体。用免疫荧光(IFA)、Dot—ELISA、ACI—ELISA等试验方法对3株McAb进行了初步鉴定。IFA试验对McAb的特异性检测结果表明,2D1E8、4A11B2、7E3G9均能与DNT+Pm—C株产生特异性荧光,尤以7E3G9荧光最强,效价最高,达1∶1280;Dot—ELISA检测3株McAb与金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌、链球菌不同菌种间的抗原交叉性反应,以及与9株DNT+Pm间的抗原交叉性反应,结果显示3株McAb与DNT+Pm发生反应,而与金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌、链球菌不同菌种的细菌不发生反应;其中以7E3G9的特异性最强。用3株McAb(2D1E8、4A11B2、7E3G9)分别包被酶标板,通过ACI—ELISA检测了9份鼻腔分泌物中的DNT+Pm抗原,与临床剖检的符合率达到100%,说明3株McAb均能有效的识别猪只鼻腔内的DNT+Pm抗原;各株McAb与SDS处理前后的DNT+Pm—C株抗原均有反应,推测3株McAb针对的抗原表位可能都是线性表位。有望用作萎鼻的快速诊断试剂盒。