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持久性有机污染物(Persistent Organic Pollutants,简称POPs)是指人工合成的,具有高毒性、半挥发性、长期残留性和生物蓄积性,在大气中、水中通过迁徙物种的长距离迁移沉积回地球,并通过食物链在人体内积累,对人类健康和环境有严重危害的有机化学污染物质。目前,POPs的检测主要基于色谱、色谱-质谱联用技术。这些技术可以分析成分复杂的物质,准确度高；但由于仪器昂贵,样品前处理复杂等缺点不利于现场大批量样品的快速分析。因此,寻求能准确、快速、灵敏地检测日化用品、食品及环境中POPs的生物分析方法已迫在眉睫。近些年来,免疫分析技术已被广泛应用于环境监测领域,同时新方法、新手段的不断涌现为发展POPs的免疫分析技术奠定了基础。免疫分析经济、简单、快速、灵敏、特异性强、分析容量大,适合复杂样品的大量样本检测。但是,由于POPs为有毒小分子,抗体制备困难,目前能开展免疫分析的POPs的数量不多。尚没有关于五溴联苯醚(BDE-121)和三(2,3-二溴丙基)异氰脲酸酯(TBC)的免疫检测报道。基于上述现状,本论文以建立POPs的快速分析方法为目标,选择潜在POPs的代表一五溴联苯醚(BDE-121)和三(2,3-二溴丙基)异氰脲酸酯(TBC)为研究对象,开展了其相关免疫分析方法的研究。主要研究内容如下：(1)抗五溴联苯醚(BDE-121)多克隆抗体的制备及应用采用本实验室设计合成的BDE-121衍生物,制备了BDE-121-BSA完全抗原,通过免疫新西兰大白兔,制备了BDE-121多克隆抗体。用制备的多克隆抗体建立了间接竞争酶联免疫吸附分析方法(IC-ELISA),优化了包被原及抗血清的浓度、缓冲溶液的pH值、离子强度和有机溶剂的种类及含量,最优条件为：包被原的浓度10μg/mL,最佳抗血清稀释倍数1：8000,分析液为pH=7.4的含20%甲醇的PBS-T缓冲溶液。在最优条件下,该方法的线性范围(IC20-80)为1.74～84.1μg/L,IC50为8.07μg/L,检测限(IC1o)为0.644μg/L。测得抗BDE-121多克隆抗体与十二种结构类似物的交叉反应率(CR%)均小于9%,表明所制备的抗体具有良好的特异性。分别采用IC-ELISA和气相色谱/质谱联用技术(GC/MS)检测了聚氨酯泡沫塑料、人血清和油漆样,两种方法的检测结果基本一致,符合实验要求。(2)抗五溴联苯醚(BDE-121)单克隆抗体的制备及其放大检测采用本实验室设计合成的BDE-121衍生物,制备了BDE-121-OVA完全抗原,通过免疫BALB/c小鼠,制备了抗BDE-121单克隆抗体。用制备的单克隆抗体及第二章建立的IC-ELISA优化了包被原及抗体的浓度、缓冲溶液的pH值、离子强度等实验条件,最优条件为：包被原的浓度为10μg/mL,抗体最佳稀释倍数1：10000,分析液为pH=7.4的含15%甲醇的PBS-T缓冲溶液。在最优条件下,分别用HRP-羊抗小鼠IgG和金纳米修饰的HRP-羊抗小鼠IgG对BDE-121进行检测,两种方法的IC50分别为3.52μg/L和2.78μg/L,灵敏度提高了21.02%。测得抗BDE-121单克隆抗体与结构类似物及其他多环芳烃的交叉反应率(CR%)小于4%,表明单克隆抗体比多克隆抗体(CR%<9%)的特异性更强。采用IC-ELISA检测了油漆样、聚氨酯泡沫塑料和人血清,回收率处于93%-110%之间,表明该方法具有可行性,适宜用于环境中BDE-121的检测。(3)抗三(2,3-二溴丙基)异氰脲酸酯(TBC)单克隆抗体的制备及应用采用本实验室设计合成的TBC衍生物,制备了TBC-Tcl-OVA、BC-Tc2-OVA、 TBC-Tc3-OVA三种完全抗原,通过免疫BALB/c小鼠,制备了抗TBC单克隆抗体。利用制备的单克隆抗体及第二章建立的IC-ELISA优化了一系列实验条件,最优条件为：包被原的浓度为10μg/mL,抗体最佳浓度为50ng/mL,分析液为pH=7.4的含25%甲醇的PBS-T缓冲溶液。在最优条件下,该方法的ICso为1.59μg/L,检测限(IC10)为0.06μg/L。测得抗TBC单克隆抗体对结构类似物及其他多环芳烃的交叉反应率(CR%)≤1.5%,比实验室之前制备的TBC多克隆抗体的CR%(≤2.0%)更低,表明TBC单克隆抗体的特异性更强。分别用IC-ELISA和三重四级杆液质联用仪(UHPLC-MS/MS)检测了自来水样、废水样、土样、血样,结果基本一致,表明该方法可行,能用于环境中TBC的检测。