【摘 要】
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牦牛是青藏高原地区的特色畜种,牦牛乳营养丰富而产量较低,但牦牛与普通牛的杂交后代（犏牛）产乳量显著提高。本研究在四川省红原县采集牦牛乳样68份和犏牛乳样41份,比较两种乳的生化成分差异和β-酪蛋白基因型,探索犏牛产乳量提高的分子基础,并建立快速鉴别牦牛乳掺入普通牛乳的方法,为牦牛和犏牛乳品质的研究和监测提供帮助。主要研究内容和结果如下:（1）测定牦牛和犏牛日挤乳量、常规乳成分和乳蛋白质的组成。结果
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牦牛是青藏高原地区的特色畜种,牦牛乳营养丰富而产量较低,但牦牛与普通牛的杂交后代（犏牛）产乳量显著提高。本研究在四川省红原县采集牦牛乳样68份和犏牛乳样41份,比较两种乳的生化成分差异和β-酪蛋白基因型,探索犏牛产乳量提高的分子基础,并建立快速鉴别牦牛乳掺入普通牛乳的方法,为牦牛和犏牛乳品质的研究和监测提供帮助。主要研究内容和结果如下:（1）测定牦牛和犏牛日挤乳量、常规乳成分和乳蛋白质的组成。结果表明,犏牛平均日挤乳量为3.06 kg,显著高于牦牛的1.02 kg;犏牛乳中蛋白质、乳糖平均含量分别为4.21%、6.10%,均低于牦牛乳的5.25%和6.66%,脂肪含量与牦牛乳相近。SDS-PAGE分析显示,犏牛乳中蛋白质组成与牦牛相似,主要包括酪蛋白（CN）、β-乳球蛋白（β-Lg）、α-乳清蛋白（α-La）等。（2）牦牛和犏牛α-La基因启动子序列分析。本研究用PCR方法检测了牦牛和犏牛α-La基因包含启动子区域部分序列（-793 bp～+87 bp）的单核苷酸多态性,发现在α-La基因启动子区域牦牛存在2处多态性:-106G＞A、-693A＞G;犏牛存在12处多态性,其中3处:-46G＞A、-89C＞T和-250G＞A可能与犏牛产乳量高有关。（3）牦牛和犏牛β-酪蛋白（β-CN）基因型及乳类型的检测。本研究采用酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了牦牛和犏牛乳β-CN的基因型,并以乳源基因组DNA为模板,用PCR扩增β-CN基因（CSN2）片段以确定CSN2在特定位点的基因型。酪蛋白电泳显示,牦牛β-CN有2种基因型:A1A2、A2A2,优势等位基因为A2,频率为0.9926,优势基因型为A2A2,频率为0.9850;犏牛β-CN的基因型有4种:A1A2、A2A2、A2A3、A2B,优势等位基因为A2,频率为0.7927,优势基因型为A2A2,频率为0.5854。牦牛和犏牛CSN2的PCR及测序均可显示2种基因型:A1A2、A2A2,且均以后者为优势基因型,但犏牛中的频率显著低于牦牛。结果表明犏牛乳以纯的A2乳为主。（4）牦牛乳及乳制品中普通牛乳的检测。本研究基于β-Lg和12S r RNA,分别利用PAGE和PCR-RFLP技术建立了快速鉴别牦牛乳及乳制品的方法,检测限为5%。对市售的1种牦牛奶粉和1种全脂灭菌牦牛奶进行鉴别,发现均无掺加黄牛乳的情况。这种方法成本低,适用于大规模样本检测,可为牦牛乳及乳制品的质量监测提供有效的技术手段。
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