目的:之前我们已经证明FABP3抑制小鼠心室肌细胞的钙瞬变和收缩,并且在我们的课题组中进行了广泛的研究。但是,抑制作用的详细机制尚未完全了解。例如,尚不清楚表面受体是否参与FABP3介导的肌力作用。G蛋白偶联的多巴胺受体主要存在于中枢神经系统中,也存在于心脏中。但是,人们对心脏中多巴胺受体的生理作用知之甚少。最近,据报道FABP3结合并调节小鼠脑中2型多巴胺受体。当前的研究中,我们决定探索心脏中不同多巴胺受体的表达及其生理作用。该课题旨在揭示心脏及心肌细胞中多巴胺受体的亚型,亚细胞分布模式以及可能的生理作用。方法:1.实验动物本实验选择的动物饲养于实时监测大气压力、湿度、室温范围为23-25℃的SPF级环境中,均为自由进食进水且周龄是12-14的C57BL/6健康雄性小鼠。2.通过q RT-PCR技术来检测心房肌细胞和心室肌细胞中DRD1及DRD2基因的m RNA水平表达。3.使用蛋白印迹法检测心肌组织中的Drd1和Drd2在蛋白水平的表达。4.使用生物标记素的方法对心肌细胞中的DRD1和DRD2进行定位。5.免疫荧光方法观察DRD1以及DRD2在心肌细胞中的分布。6.通过q RT-PCR技术来检测小鼠心房肌细胞和心室肌细胞的DRD1及DRD2基因的m RNA水平表达。结果:1.心肌细胞中所有多巴胺受体亚型的m RNA表达,其中DRD1和DRD2是最主要的。2.通过免疫印迹检测出巴胺受体在心室肌细胞有表达,表达水平在靠近心内膜下层和靠近心外膜下层部分无显著性差异。3.免疫荧光检测出多巴胺受体在心室肌细胞中的表达。4.生物素标记实验发现,DRD1大部分存在与细胞中,细胞膜上只有一小部分分布;几乎所有DRD2都在细胞内分布,细胞膜上几乎检测不到DRD2。5.DRD1和DRD2基因在小鼠心房肌细胞和心室肌细胞中均有表达,且表达水平都在心房肌细胞中更高。结论:1.我们确认了心脏及心肌细胞中多巴胺受体不同亚型的存在和亚细胞分布。2.细胞膜上的DRD1可能参与调节FABP3在心肌细胞中发挥的作用。