鲍曼不动杆菌耐药基因的检测及同源性分析

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目的:通过分析襄阳市中心医院鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)的耐药情况,耐药基因的检测及流行趋势分析,为临床合理用药提供参考,并为减少耐药菌株的流行及传播奠定基础。  方法:收集2010年8月至2011年7月我院临床分离的非同一患者的Ab,采用纸片扩散法(K-B法)进行药敏试验,以美国临床实验室标准委员会(CLSI)2011年版为判断标准,药敏结果使用WHO提供的WHONET5.4软件进行统计分析;应用聚合式酶链反应(PCR)对22株泛耐药鲍曼不动杆菌(Pan drug resistance,PDR-Ab)的OXA-23、OXA-24、OXA-58、TEM、SHV、CTX-M、PER、DHA、IMP、VIM、SIM、AAC(3)-Ia、AAC(3)-IIa、AAC(6)-Ih、AAC(6)-Ib、Int-1、Int-2、adeA、adeB、adeC、adeR、adeS耐药基因进行检测,并通过双脱氧末端终止法对PER阳性基因进行测序;采用肠杆菌科间基因重复序列(ERIC)-PCR与脉冲场凝胶电泳(PFGE)对22株PDR-Ab进行同源性分析。  结果:2010年8月至2011年7月我院临床分离的223株Ab来源于呼吸道、脓液、穿刺液等标本,其中呼吸道标本检出率为70.9%。223株Ab对各类药物呈现不同的耐药率,其中复方新诺明的耐药率最高,79.8%,头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低,17.5%,并检出22株泛耐药菌。22株PDR-Ab对亚胺培南、美罗培南和头孢哌酮/舒巴坦耐药率分别为50%,40.9%,31.8%,其余抗菌药的耐药率均为100%。PCR扩增结果显示,22株PDR-Ab携带基因分别为:OXA-23基因22株、TEM基因16株、PER基因4株、IMP基因12株。全部携带AAC(6)-Ib基因,有19株菌含有AAC(3)-Ia基因。主动外排表型检测显示14株为阳性菌株,并检测出主动外排的相关的adeR基因15株及20株adeS基因。PFGE聚类分析结果显示22株PDR-Ab分为A(15株)、B(7株)两个类型。ERIC-PCR技术将22株PDR-Ab分为5个基因型,其中以b型(9株)最多。  结论:1.本院鲍曼不动杆菌对常用抗生素的耐药率较高,泛耐药率高达9.9%。2.我院的Ab携带的耐药基因主要是OXA-23群基因、AAC(6)-Ib基因。  3.我院中心ICU在2010年8月至2011年7月期间存在PDR-Ab的流行菌株。
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