近年来随着抗生素的大量使用,细菌耐药现象日渐严重,且抗生素的研发速度远低于细菌耐药性的产生速度,因此,需要寻找应对耐药细菌的新方法。噬菌体作为感染细菌的病毒,具有数量多、特异性强等优点,有望替代抗生素作为消除环境病原菌的有效手段。本研究从贵州开阳、西藏乃东和辽宁盘锦三个地点采集的13个样品(6个沉积物样品、6个水样和1个钟乳石表面样品)中分离细菌及其相应的噬菌体。同时对宿主菌的抗生素耐药性以及噬菌体的生物学特性进行研究,并且利用全基因组测序、功能注释以及进化分析对噬菌体基因组结构进行初步探究。最终分离了39株细菌以及一株以Klebsiella quasipneumoniae为宿主的噬菌体KL01,宿主菌Klebsiella quasipneumoniae具有多重耐药性。噬菌体KL01属于短尾噬菌体科,最佳感染复数MOI=4,能够较快的裂解宿主菌,只能以Klebsiella quasipneumoniae为宿主,特异性强。基因组分析结果显示,KL01的全基因组大小为45.854kbp,GC含量为42.5%;KL01全基因组有40个ORF,其中22个功能已知,18个为假想蛋白,不携带抗生素抗性基因与毒性基因;KL01与短尾噬菌体科(Podoviridae)中的SP6-like噬菌体属的亲缘关系较近。本研究中宿主菌Klebsiella quasipneumoniae具有致病性,可以引起化脓性肝脓肿,但其对多种抗生素具有耐药性。噬菌体KL01因其裂解速度快,特异性强并且不携带毒性基因和抗性基因,所以当其应用于环境中Klebsiella quasipneumoniae污染治理方面时,对环境影响较小且更加安全。本研究中分离的噬菌体KL01有潜力取代抗生素被应用于环境中致病菌Klebsiella quasipneumoniae的控制。