【摘 要】
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该文以完整百合花粉原生质体为材料,应用I-钙调素和地高辛标记钙调素作探针,检测了百合花粉原生质体质膜外表面的钙调素结合特性,并结合化学交联法,检测了质膜外表面钙调素结
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该文以完整百合花粉原生质体为材料,应用<125>I-钙调素和地高辛标记钙调素作探针,检测了百合花粉原生质体质膜外表面的钙调素结合特性,并结合化学交联法,检测了质膜外表面钙调素结合蛋白的分子量.得到以下初步结论:用不同方法标记的几种钙调素探针可以用于不同方法检测钙调素的结合位点.以地高辛标记钙调素和<125>I-钙调素为探针,采用共价交联法在完整花粉原生质体膜外表面检测到一个100~110kDa的交联复合物.应用<125>I-钙调素为探针对膜表面的钙调素结合特性的研究显示完整花粉原生质体与不同浓度的<125>I-钙调素结合具有剂量依赖效应.不同浓度的未标记钙调素可竞争<125>I-钙调素与完整花粉原生质体的结合,提示钙调素与完整花粉原生质体表面的结合具有特异性.此外,该文还用发光物质N-氨基丁基-N-乙基异鲁米诺,采用碳二亚胺缩合法,成功地标记了动物及植物钙调素,建立了化学发光免疫法定量植物钙调素的新方法.该法灵敏度高、重复性好.检出范围30~3000ng/ml,检出下限为3ng/管.重复性试验显示批内变异系数为4.6~13.2﹪,批间变异系数为9.3~16﹪,各项指标均与放射免疫法测定钙调素含量相媲美,同时避免了放射性元素的污染.与此同时,对一种抗植物钙调素抗体和三种动物钙调素抗体在免疫学定量中的不同特性做了比较研究.
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