【摘 要】
:
目的:构建人CYP4Z1 RNAi重组慢病毒载体,初步研究RNAi敲减CYP4Z1对乳腺癌细胞系增殖及凋亡的影响。方法:(1)构建三种CYP4Z1 RNAi重组慢病毒载体;(2)采用RT-PCR和Western Blotting法分别检测MDA-MB-468、T-47D和MDA-MB-231细胞中CYP4Z1的表达,筛选出CYP4Z1高表达的乳腺癌细胞;(3)将成功构建的三种CYP4Z1 RNAi
论文部分内容阅读
目的:构建人CYP4Z1 RNAi重组慢病毒载体,初步研究RNAi敲减CYP4Z1对乳腺癌细胞系增殖及凋亡的影响。方法:(1)构建三种CYP4Z1 RNAi重组慢病毒载体;(2)采用RT-PCR和Western Blotting法分别检测MDA-MB-468、T-47D和MDA-MB-231细胞中CYP4Z1的表达,筛选出CYP4Z1高表达的乳腺癌细胞;(3)将成功构建的三种CYP4Z1 RNAi重组慢病毒载体转染CYP4Z1高表达的乳腺癌细胞;(4)通过RT-PCR法检测转染后细胞CYP4Z1m RNA的表达情况,筛选出敲减率最高的CYP4Z1 RNAi重组慢病毒载体;(5)实验分为三组,分别为空白对照组、空质粒转染组以及CYP4Z1 RNAi重组慢病毒载体转染组。通过MTT法检测乳腺癌细胞增殖的情况,流式细胞仪检测乳腺癌细胞的凋亡。结果:酶切以及测序结果证实成功构建了3组不同的重组慢病毒载体(LV-CYP4Z1-RNAi-1/2/3)。RT-PCR和Western Blotting结果显示,在MDA-MB-468乳腺癌细胞中CYP4Z1m RNA和蛋白表达显著高于MDA-MB-231及T-47D细胞(p<0.05)。三组RNAi重组慢病毒载体感染MDA-MB-468细胞后,CYP4Z1m RNA表达受到抑制,其中以LV-CYP4Z1-RNAi-2组抑制作用最显著,敲减率达到81%(p<0.01)。与空白对照组及空质粒转染组相比,LV-CYP4Z1-RNAi-2组的MDA-MB-468细胞增殖受到抑制,且凋亡明显增加(p<0.01)。结论:CYP4Z1在MDA-MB-468乳腺癌细胞系中显著高表达。构建的CYP4Z1RNAi重组慢病毒载体成功敲减了MDA-MB-468细胞中的CYP4Z1的表达,能够显著抑制乳腺癌细胞增殖,并增加细胞的凋亡。本实验为后续研究CYP4Z1在乳腺癌中的作用奠定了基础。
其他文献
公民的政治素养反映了一个国家整体的政治文明水平,对高中生开展长期的政治立场和政治素养的培育,一直是我国教育体系中不可或缺的一环。高中生正值其人生观、价值观形成的关键时期,这一时期高中中所接受、认同并形成的政治认同素养,将在其未来整体人生规划和发展过程中起着决定性的作用。培育高中阶段学生的政治素养,推动其形成正确的政治观和思想观,是发展学生形成健康的、正确的价值观和政治观的重要内容,是目前我国高中阶
背景:至今,梅毒活动性和疗效评价依然困难,缺乏梅毒疗效评判标准,临床上通常采用血清非特异性抗体滴度和/或滴度四倍下降作为参考指标。然而,有关梅毒患者在梅毒螺旋体(Trepo
为研究开发高效的放射防护剂,本课题利用基因重组技术将SOD1(Cu,Zn超氧化物歧化酶)和九个精氨酸的穿膜肽R9以及基质金属蛋白酶底物肽X(PLGLAG)结合,合成SOD1-R9和SOD1-X-R9全
随着计算机视觉技术日趋成熟,目标跟踪技术逐步引起了人们的关注,渐渐成为了一个有着良好前景的学科分支。近年来,在各国研究学者的努力下,一些高水平的视觉跟踪方法陆续诞生
近年来,随着科技水平不断提升,各种高新军事武器和防御系统得到了快速发展,在保卫国土安全中发挥了举足轻重的作用。为了在军事行动中掌握主动权,争取最佳的作战效果,实时获
在城乡二元体制的结构性背景和农民工回流、城市升学受阻、城市教育费用上涨等现实性背景的共同作用下,返乡农民工子女的数量开始初具规模。同样是农民工子女,与留守儿童和流动儿童相较而言,返乡农民工子女并没有引起学术界和社会大众的足够关注。“半城市化”的返乡农民工子女从城市社会返回到乡土社会,势必会面临一个乡土适应问题。所以本文的研究问题是:返乡农民工子女在返乡后不同阶段的“实然”适应状态是怎样的?是什么关
自从第一次产业革命以来,机器替代劳动力就业的现象就已经出现,失业问题成为了各界学者关注的问题,也是各国政府和经济学家一直在寻找解决办法的现实问题。经济学家熊彼特曾
遮挡现象在人们日常生活中无处不在,而遮挡现象的产生会导致视觉任务最终结果不尽人意,甚至是失败。随着人工智能,计算机视觉、自动化等领域的快速发展,如何对运动视觉目标遮
随着当前计算机技术和互联网技术的发展成熟,使得保山学院工程技术学院实验设备与材料管理事务的信息化和自动化管理成为可能。保山学院工程技术学院实验室每年都会引进大量
经济全球化和日益复杂的企业经营环境使供应链突发事件频繁发生。突发事件之间相互作用会形成多突发事件耦合,从而对供应链节点企业与供应链系统造成更严重的损失。因此,研究多突发事件耦合效应的解耦技术,把控突发事件在供应链系统中的演化路径和影响,对于供应链系统有效应对复杂多突发事件耦合,提高供应链系统的鲁棒性和灵活性十分重要。鉴于此,研究供应链突发事件耦合解耦控制与节点风险传播具有重要的理论和实践意义。本文