目的:构建人CYP4Z1 RNAi重组慢病毒载体,初步研究RNAi敲减CYP4Z1对乳腺癌细胞系增殖及凋亡的影响。方法:(1)构建三种CYP4Z1 RNAi重组慢病毒载体;(2)采用RT-PCR和Western Blotting法分别检测MDA-MB-468、T-47D和MDA-MB-231细胞中CYP4Z1的表达,筛选出CYP4Z1高表达的乳腺癌细胞;(3)将成功构建的三种CYP4Z1 RNAi重组慢病毒载体转染CYP4Z1高表达的乳腺癌细胞;(4)通过RT-PCR法检测转染后细胞CYP4Z1m RNA的表达情况,筛选出敲减率最高的CYP4Z1 RNAi重组慢病毒载体;(5)实验分为三组,分别为空白对照组、空质粒转染组以及CYP4Z1 RNAi重组慢病毒载体转染组。通过MTT法检测乳腺癌细胞增殖的情况,流式细胞仪检测乳腺癌细胞的凋亡。结果:酶切以及测序结果证实成功构建了3组不同的重组慢病毒载体(LV-CYP4Z1-RNAi-1/2/3)。RT-PCR和Western Blotting结果显示,在MDA-MB-468乳腺癌细胞中CYP4Z1m RNA和蛋白表达显著高于MDA-MB-231及T-47D细胞(p<0.05)。三组RNAi重组慢病毒载体感染MDA-MB-468细胞后,CYP4Z1m RNA表达受到抑制,其中以LV-CYP4Z1-RNAi-2组抑制作用最显著,敲减率达到81%(p<0.01)。与空白对照组及空质粒转染组相比,LV-CYP4Z1-RNAi-2组的MDA-MB-468细胞增殖受到抑制,且凋亡明显增加(p<0.01)。结论:CYP4Z1在MDA-MB-468乳腺癌细胞系中显著高表达。构建的CYP4Z1RNAi重组慢病毒载体成功敲减了MDA-MB-468细胞中的CYP4Z1的表达,能够显著抑制乳腺癌细胞增殖,并增加细胞的凋亡。本实验为后续研究CYP4Z1在乳腺癌中的作用奠定了基础。