杨树应答盐胁迫NAC基因的筛选及功能分析

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NAC转录因子家族在植物应答非生物胁迫及生长发育过程中具有重要作用。本研究以小黑杨为材料,利用RT-qPCR从170个杨树NAC转录因子家族基因中筛选出125个应答盐胁迫的基因。PtrNAC15基因在盐胁迫条件下表现为下调表达,该基因表达具有组织特异性,在次生木质部中表达水平明显高于在其他组织中的表达水平。克隆PtrNAC15基因的cDNA片段,构建植物表达载体,培育转基因烟草。分析转PtrNAC15基因烟草生理指标。结果表明,转PtrNAC15基因烟草比对照的耐盐能力明显增强,表现为在盐胁迫条件下转基因烟草种子的萌发率、株高、鲜重、干重、根长均高于对照株系。同时,转PtrNAC15基因烟草木质素与纤维素相关基因表达水平明显提高,其半纤维素、木质素及纤维素含量均明显比对照株系高,间苯三酚染色显示转基因烟草次生壁变厚。构建PtrNAC15基因启动子驱动GUS基因植物表达载体,用农杆菌介导法侵染烟草幼苗。GUS染色结果表明,该启动子驱动的报告基因在根、茎、叶中均有表达,但在茎中的表达水平明显高于其他组织。该结果与基因的组织特性分析结果一致。
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