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四逆散是由柴胡、白芍、枳实、甘草组成的复方制剂,始载于《伤寒论》。本课题对四逆散有效成分的提取和成分分析进行了研究。对四逆散全方进行水煎,分别提取了四逆散中单味药的枳实挥发油、芍药苷粗品、柴胡皂苷粗品、甘草黄酮、甘草酸及甘草次酸部位,进行了小鼠胃排空和肠推进试验,试验结果表明,四逆散全方煎剂对小鼠胃排空和肠推进有促进作用,且对胃肠的作用是全方的综合体现。 通过对四逆散水煎剂的工艺条件的考察,以浸膏量和芍药苷含量为指标进行正交试验,得到了最佳煎煮工艺为加8倍量水,煎煮1.5小时,煎煮3次。 首次用大孔吸附树脂对四逆散全方煎煮液进行富集和纯化,且对精制前后的成分进行了薄层色谱定性鉴别研究,测定了精制前后芍药苷的含量,进行了精制前后对胃肠运动影响的药效学对比。结果表明,对四逆散全方煎剂的富集和纯化,运用D141A大孔吸附树脂,其最大吸附量为1:3.2,即1g树脂吸附3.2mg指标性成分。确定了以60%的乙醇为洗脱剂,且确定洗脱剂与芍药苷含量为0.0725mg/ml的四逆散药液的体积用量比为3:1。此外,还发现,低浓度的盐溶液会降低大孔吸附树脂的吸附量,温度升高亦会降低其吸附量。 对四逆散中柴胡、枳实的挥发性成分进行了水蒸汽蒸馏和超临界提取,利用GC-MS进行了成分分析和比较,其中对枳实的GC-MS分析尚属首次。结果表明,水蒸气蒸馏法提取的枳实挥发油中鉴定出38个主要成分,占挥发油组分的90%以上,主要成分为小分子的烯类、萜类、酚类和醇类;超临界萃取的枳实低极性成分中鉴定出26个主要成分,占低极性组分的43%以上。水蒸气蒸馏法和超临界萃取测定柴胡挥发油成分比较发现,鉴别峰的数量相对较少,水蒸汽蒸馏法提取的柴胡挥发油中鉴定出13个主要成分,占挥发油组分的18%以上,主要成分为百里基甲基醚、β—蛇床烯等;超临界萃取的柴胡低极性成分中鉴定出9个主要成分,占低极性组分的20%以上。主要成分为D-苎烯、3-蒈烯等。