脊髓半横断损伤后神经营养因子和凋亡基因的表达变化

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[目的]:探讨脊髓半横断损伤(hSCI)后不同时间脊髓腹角运动神经元中神经营养因子和凋亡基因的表达变化。 [方法]:取成年SD大鼠24只,随机分4组:假手术组、脊髓半横断损伤3天、7天组和21天组,每组6只动物。取假手术组T10脊髓节段、损伤组损伤位点尾侧段T10脊髓节段,入4%多聚甲醛固定,20%蔗糖PBS沉底,于-20℃恒冷切片机上连续切片,片厚20μm,分别用兔抗NGF、BDNF、NT-3、bFGF、GDNF、Bax、Bcl-2、Fas抗体行免疫组化ABC法染色。观察并测量各组脊髓腹角运动神经元中NGF、BDNF、NT-3、bFGF、GDNF、Bax、Bcl-2、Fas蛋白的分布及阳性神经元数,用q检验进行统计分析。 [结果]:1.NGF、BDNF、NT-3、bFGF、GDNF在正常成年大鼠脊髓腹角神经元均有表达。NGF阳性产物的亚细胞定位主要分布于细胞浆,细胞核、神经元突起染色相对较浅。NT3阳性产物的亚细胞定位主要分布于细胞核,细胞浆、神经元突起染色相对较浅。BDNF、bFGF、GDNF阳性产物的亚细胞定位主要分布于细胞浆,细胞核不着色。NGF、BDNF、NT-3、bFGF、GDNF阳性神经元数在术后3天组、7天组、21天组较假手术组明显增加。BDNF、NT3、bFGF阳性神经元数术后3天时达高峰,随伤后时间的延长进行性减少。NGF、GDNF阳性街皿半横断损伤后神经营养因子和凋亡基因的表达变化神经元数增加持续至21天,7天时达高峰,21天组仍高于正常水平,但与3天组比较无显著性差异。2.凋亡基因Bax、Bd一、Fas在正常成年大鼠脊髓腹角神经元中均有表达,阳性反应物定主要位于细胞浆,细胞核不着色。Bax、Bd一2、Fas阳性神经元数在3天组、7天组、21天组较假手术组显著增加。Bax、Fas阳性神经元数3天时达高峰,随伤后时间的延长有下降趋势;Bcl一2阳性神经元数7天时达高峰,3天组与21天组相比无统计学意义。 [结论1:1.脊髓半横断损伤后,NGF、B洲F、NT3、bFJ、o侧r的表达在脊髓腹角神经元被不同程度地上调,且上调时程不同,提示它们可能与脊髓损伤修复有关,且各自发挥作用的时间有所不同。2.脊髓半横断损伤后,凋亡基因Bax、Bd一2、Fas在脊髓腹角神经元大量表达,提示它们可能与脊髓损伤后神经细胞的凋亡有关。
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