影响绵羊胚胎移植效果相关基因的研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:zsz520
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国内外对绵羊胚胎移植技术的研究已有几十年的历史,但由于受各种因素的影响,效果并不十分稳定,分子标记辅助选择为解决这一问题提供了新的思路。BMPR-IB基因的突变(A746G)与Booroola Merino羊高繁殖力性状密切相关;FSHR基因在哺乳动物生殖过程中具有重要的作用,FSH和FSHR间的相互作用对于正常精子和卵子的发生是至关重要的。本研究以BMPR-IB基因和FSHR基因为候选基因,以小尾寒羊及其杂交羊、东北半细毛羊、澳洲美利奴羊、德国肉用美利奴羊、萨福克羊、特克塞尔羊、夏洛莱羊为实验对象,采用PCR-RFLP和PCR-SSCP两种标记方法进行基因单核苷酸多态性(SNP)检测和基因型分析,针对实验群体的特点建立合适的统计分析模型,进行BMPR-IB基因和FSHR基因SNPs与胚胎移植各项指标间的相关分析。研究结果如下:1.在7个绵羊品种中,对BMPR-IB基因A746G突变进行检测,群体遗传学分析表明基因型频率在品种间存在极显著差异(P<0.01)。2.携带B等位基因的群体较非携带B等位基因的群体自然状态下排出更多的卵子,差异极显著(P<0.01),且排卵后黄体直径较小,差异显著(P<0.05)。3. BMPR-IB基因不同基因型绵羊群体移入冷冻胚胎后表现出不同的移植后妊娠率,BB型群体显著高于其它基因型群体,达到了66.67%,冷冻胚胎移植妊娠率接近了鲜胚移植的妊娠率。因此推断,BMPR-IB基因突变很有可能从增加卵巢排卵数和提高胚胎着床及妊娠建立效率两个方面同时影响绵羊高繁殖力性状。由此可以通过PCR-RFLP方法进行基因型分析,选用合适的基因型群体作为胚胎移植受体,从而为提高绵羊胚胎移植妊娠率提供新的方向。4.对绵羊FSHR基因第10外显子全长进行PCR-SSCP检测,但未发现与人类和牛相似的SNPs。5.在FSHR基因5’调控区检测到三个SNP位点存在。其中,引物FSHRP1扩增产物中检测到C-528T突变,群体遗传学分析表明基因型频率在品种间存在显著差异(P<0.05);引物FSHRP2扩增产物中检测到C-629T和T-681C突变,群体遗传学分析表明基因型频率在品种间存在显著差异(P<0.05)。6.绵羊FSHR基因5’调控区C-528T突变与超排处理后卵巢上黄体数量的表型变异存在显著相关(P<0.05);推测FSHR基因5’调控区突变可能影响FSHR基因的表达,从而影响FSH生物学作用的发挥,进一步对胚胎移植效果产生影响。
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