生物表面活性剂是一类含有亲水和亲油基团的物质,其中人们研究的较为详细的是鼠李糖脂。由于生物表面活性剂具有很好的乳化、助溶等效果,并且具有生物可降解性及无毒性,使其在微生物采油和其它应用中倍受重视,用微生物提高原油的采收率（MEOR）已成为一种极具应用潜力的技术。本论文旨在通过基因工程的方法,将铜绿假单胞菌的鼠李糖脂合成酶基因在石油微生物中进行表达,使受体菌获得高效产生生物表面活性物质（鼠李糖脂和烷基酰酸HAA）的特性,并将其应用于微生物提高原油的采收率或是环境污染物的处理等方面。 我们从大庆油田和长期被石油污染的土壤中取样,进行了菌种的分离,从中分离出了许多能以原油为碳源进行生长的菌株,也通过另外的方法筛选到了可以产生表面活性剂的菌株。在实验中发现许多菌株除了能以原油为碳源生长以外,还对原油有很好的降粘效果。经过菌种鉴定分析表明这些菌株主要是以假单胞菌（Pseudomonas sp.）和芽孢杆菌（Bacillus sp.）为主。对菌株的生化特性研究表明,不同的菌株对不同链长的烃的利用情况不同。而耐盐、耐温的实验表明大部分菌株可以在0—10%浓度的NaCl和60℃以下生长。经过质谱分析表明所筛选的一些菌株在以原油为碳源进行生长时,能够产生一些酸类物质,如丁酸等。而另一些菌株的发酵液能降低油水间的界面张力,通过表面活性剂的作用还可以降低原油的粘度。生物表面活性剂可以防止原油中蜡质的凝结,实验中发现L11菌株的发酵液对原油的防蜡率可以达到30%以上。 根据不同的应用目的,我们分别对菌株L11和DQ2的发酵条件进行了研究,确定了其最适的发酵条件,其中L11的发酵是为了获得大量的代谢产物表面活性剂,我们通过补糖和控制pH的方法,可以使L11的发酵液对油水的界面张力达到5.3×10^-3mN/m。而DQ2的发酵条件的研究则是为了获得大量的菌体细胞,在此过程中我们建立了发酵终点的快速检测方法。同时,我们也确定了保存大量的L11和DQ2的发酵