为研究离体培养条件下肉鸡不同部位脂肪前体细胞分化差异及其分子机制,本试验采用胶原酶消化法,分别从黄羽肉鸡皮下、腹腔内脂肪以及肌肉中分离脂肪前体细胞。分离得到的不同部位脂肪前体细胞在含10％胎牛血清的DMEM/F12完全培养液进行培养、传代及纯化。采用免疫细胞化学法和MTT法对纯化后的脂肪前体细胞进行鉴定和增殖检测。另外,用含胰岛素、地塞米松、IBMX及油酸的完全培养液诱导脂肪前体细胞分化,在分化不同时间点对细胞进行油红O染色和细胞内甘油三酯含量测定。同时,采用实时荧光定量PCR法检测脂肪前体细胞分化过程中转录调控因子基因(PPARγ与SREBP-1)、甘油三酯合成与分解相关酶基因(ACC与ATGL)及脂肪酸转运相关基因(LPL、FAT与aP2)mRNA的表达模式。　　 研究结果表明:　　 1.采用胶原酶消化法分离成功得到黄鸡皮下、腹腔内及肌内脂肪前体细胞,经pref-1抗体鉴定,细胞阳性率达95％以上。　　 2.采用含100nM胰岛素、1μM地塞米松、0.5mM IBMX及300μM油酸的完全培养液诱导鸡脂肪前体细胞,细胞分化效果良好。鸡不同部位脂肪前体细胞分化存在差异,其中皮下脂肪前体细胞分化速率最高,分化能力最强。细胞诱导96h后,聚酯程度为:皮下＞肌内＞腹腔内。　　 3.聚酯相关基因的检测结果显示:(1)在诱导分化早期,皮下脂肪前体细胞转录调控因子mRNA表达量较其他两个部位细胞更高。腹腔内脂肪前体细胞PPARγ的表达于诱导24h后开始迅速上调。总体而言,鸡脂肪前体细胞SREBP-1的表达量较低。(2)三个部位脂肪前体细胞ACC mRNA表达量较低。皮下脂肪前体细胞ATGL mRNA表达量较腹腔内脂肪前体细胞低。诱导后的肌内脂肪前体细胞该基因的mRNA表达有所下调。(3)皮下脂肪前体细胞LPL mRNA表达于诱导后迅速上调,而其他两个部位的前体细胞该基因mRNA的表达较低。腹腔内脂肪前体细胞FAT/CD36 mRNA表达量显著高于其他两个部位细胞,其中以皮下脂肪前体细胞的表达量最低。诱导后的皮下脂肪前体细胞aP2 mRNA表达量迅速升高,并显著高于肌内脂肪前体细胞,腹腔内脂肪前体细胞最低。