【摘 要】
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番茄（Solanum lycopersicum）是种植面积最大的蔬菜作物之一。番茄斑萎病（Tomato spotted wilt virus,TSWV）是一种广泛发生的世界性病害,温室及露地均可发生。该病发生时会严重降低果实的产量和品质。因此,抗番茄斑萎病品种选育已经成为番茄育种的主要目标之一。因为地理差异,该病毒种类多,亲缘关系复杂。本研究对陕西杨凌地区番茄斑萎病毒外壳蛋白基因结构进行了分析鉴定
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番茄（Solanum lycopersicum）是种植面积最大的蔬菜作物之一。番茄斑萎病（Tomato spotted wilt virus,TSWV）是一种广泛发生的世界性病害,温室及露地均可发生。该病发生时会严重降低果实的产量和品质。因此,抗番茄斑萎病品种选育已经成为番茄育种的主要目标之一。因为地理差异,该病毒种类多,亲缘关系复杂。本研究对陕西杨凌地区番茄斑萎病毒外壳蛋白基因结构进行了分析鉴定,以抗性鉴定筛选出的感病材料M82和抗病材料H149为亲本构建遗传群体并分析了抗性遗传模型,利用SSR分子标记对番茄斑萎病抗性QTL进行了初步定位,以期为番茄斑萎病抗性育种提供指导。主要结果如下:1.杨凌地区番茄斑萎病毒鉴定。通过田间表型观察采集4份疑似番茄斑萎病感病材料,PCR分子鉴定。其中2份检测样品扩增到234bp的TSWV特异性条带,其序列与Gen Bank中TSWV序列相似性达到98%以上,表明这2个材料均携带TSWV病毒,暂命名为TSWV-YL分离物,同源克隆了TSWV-YL的外壳蛋白基因（CP）,序列大小为757bp,氨基酸序列与Genbank登录号为FR693089.1的同源性最高为99%;TSWV-YL-CP具有一个跨膜结构,位于95～122bp之间;系统进化树显示,TSWV-YL番茄分离物与西班牙辣椒TSWV分离物处于同一分支,亲缘关系最近。2.番茄抗斑萎病种质材料的筛选。对154份番茄种质材料进行田间自然发病病指调查,获得抗病材料14份,其中普通番茄3份,樱桃番茄11份;利用sw-5-2共显性SCAR标记对14份抗病材料进行分子鉴定,其中3份材料含有sw-5的574bp的特异性条带,其余11份材料虽在田间表现抗性,但并未检出574bp特异性条带;利用sw-7连锁的SSR标记对14份材料进行检测,并均未检出条带,表明田间筛选出的11份抗病材料中可能含有其他或是新的抗病基因,有待进一步鉴定挖掘。3.番茄斑萎病抗病性鉴定方法与种质材料的抗性评价。在田间抗病种质中筛选出含有sw-5抗性资源的H8,以及利用sw-5、sw-7连锁标记均未检出现条带的H149,和感病材料M82,在幼苗6片真叶时分别进行人工摩擦接种TSWV-YL,H8人工接种病指为4.41,表现为高抗;H149人工接种病指为3.8,也表现为高抗;M82人工接种病指为67.91,表现为高感。4.番茄斑萎病抗性遗传分析。以筛选出的感病材料M82和抗病材料H149为亲本构建遗传群体,对P1、P2、F1、F2人工接种鉴定分析,通过分布参数与遗传参数的相互关系,运用SEA软件估算出番茄斑萎病抗性性状的遗传参数,该性状受两对主基因控制,以加性效应为主符合两对加性-显性-上位性主基因+多基因遗传模型（MX2-ADI-A DI）。在遗传率方面,在F2代的主基因遗传率为69.65%,多基因遗传率为10.22%,说明该组合性状受主基因影响为主。5.番茄斑萎病抗性基因QTL初定位。以筛选出的感病材料M82和抗病材料H149为亲本构建遗传群体,应用SSR分子标记构建了含有140个标记位点的遗传连锁图谱。构建连锁遗传图谱,标记间平均间距为49.75c M,标记间最小遗传距离为2.05c M,最大遗传距离为91.59c M。检测到控制番茄斑萎病抗的QTL位点3个,其中两个位点位于3号染色体,一个位点位于5号染色体,贡献率分别为4.6%,5.3%,4.9%。
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