本研究结合了标记地高辛的RT-PCR技术和生物素标记的探针杂交技术，成功建立了一种检测猪瘟病原的RT-PCRELISA方法，组装了试剂盒，并进行了初步应用。 从5-UTR(Un-translatedregion)区域设计了特异性的引物和捕获探针，在PCR过程中加入了地高辛标记，将探针作生物素标记。利用链亲和素包被的ELISA酶标板与生物素标记的探针特异性结合，而探针又特异性地与标记了地高辛的PCR产物相结合，最后采用抗地高辛的辣根过氧化物酶与ABTS进行显色。实验过程中成功摸索了RT-PCRELISA过程的各项条件，确定了最佳的工作浓度与温度以及反应时间。本研究结果表明：链亲和素的最佳包被浓度为1ug/ml，探针的最佳浓度为50ng/ml，PCR产物的浓度为每孔10ul，抗地高辛辣根过氧化物酶的稀释浓度为1∶3000，最佳的杂交温度为50℃，最佳的杂交时间为30-60分钟。 对试剂盒内试剂的保存作了防腐剂选择实验和保存期试验，结果表明在试剂盒保存了10个月以后，阴阳性对照仍然成立。在防腐剂叠氮钠和柳硫汞酸钠的选择实验中发现叠氮钠对酶有一定影响，大大降低了实验OD值，因此选择柳硫汞酸钠作为试剂盒的防腐剂。采用本实验建立的试剂盒对来自北京三个猪场50头份病料进行了检测，结果发现有36头份为阳性，14头份为阴性。 本研究建立了一种快速、敏感、特异的猪瘟RT-PCRELISA方法，为我国猪瘟的诊断、监测和调查提供了良好的新型技术手段，为保障北京市和我国的安全猪肉生产奠定了扎实的基础。