研究背景和目的脂肪移植是整形外科软组织填充与重建的理想方法。但不可预测的保留率极大地限制了其应用。在临床中,自体脂肪隆胸和面部年轻化等软组织填充常涉及肌肉相关的脂肪移植。但肌肉内移植脂肪保留率相较于皮下及脂肪内更不理想。因此,研究一种可用于临床的,提高肌肉相关脂肪移植保留率的方法是十分必要的。目前认为,肌肉相关脂肪移植的保留率受限于肌肉的运动作用。A型肉毒素(Botulinum toxin type A,BoNTA)是一种神经毒,它能阻断运动神经末梢乙酰胆碱的释放,抑制肌肉收缩,致使肌萎缩,因而被应用于改善面部皱纹和减少肌肉体积等领域。因此,选用BoNTA作为本实验中肌肉的制动条件,是可逆、安全且临床可行的。本研究目的在于将BoNTA应用于肌肉相关脂肪移植模型中,观察其对保留率的影响并分析其原因,探索一种可应用于临床的提高肌肉相关脂肪移植保留率的新方法。研究方法将肌肉相关脂肪移植分为肌肉表面和肌肉内两部分。分别设置对照组:将人脂肪组织单纯移植到裸鼠股四头肌表面(或肌肉内);Pre-BTX+组:提前在股四头肌表面(或肌肉内)注射BoNTA,一周后进行肌表面(或肌肉内)脂肪移植;BTX+组:将人脂肪组织和BoNTA混合后注射到股四头肌表面(或肌肉内)。利用组织学方法观察脂肪组织改变,分析脂肪细胞存活情况、干细胞数量及血管数量等指标;CatWalk XT步态分析量化BoNTA对肌肉的制动作用;利用生物力学方法,检测BoNTA对于移植区微环境改变,结合免疫蛋白印迹法探索移植区刚度改变对脂肪新生影响,及其对脂肪来源干细胞(Adipose-derived stem cells,ASCs)成脂分化影响。结果应用BoNTA的肌肉表面脂肪移植,实验组移植物保留率明显优于对照组,且实验组有更多新生血管和更明显的脂肪新生迹象。CatWalk步态分析结果显示,BoNTA使股四头肌长期处于制定且悬空的休息位,肌肉运动显著减少,制动作用在4周时最明显。肌肉内脂肪移植保留率远低于肌肉表面,但移植物较肌肉表面血管化更好。应用BoNTA后实验组保留率有所提高,血管化程度进一步提高,出现大量新生脂肪前体细胞,成脂相关蛋白表达升高,但这些前体细胞在后期并未长成成熟脂肪细胞,且应用BoNTA后股四头肌刚度明显下降。结论影响脂肪移植最终转归的因素主要有血管化和微环境。肌肉表面和肌肉内受区面临各自不同的困境:肌肉表面脂肪移植穿支血管难建立,BoNTA暂时制动肌肉,使移植物处于较稳定状态,可促进血管化和成脂分化以改善保留率;肌肉内脂肪移植本就可建立充足血供,但微环境不佳,利用BoNTA降低机械力和肌肉刚度,使微环境更利于成脂,可获得更好保留。