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以毛竹笋为原料,采用超声辅助提取技术,研究了水料比、提取温度、提取时间、超声功率和乙醇浓度对竹笋多糖得率的影响,在此基础上应用响应面法对提取工艺进行优化。结果表明,竹笋多糖的最佳提取工艺为:水料比30∶1、提取温度50℃、提取时间35 min、乙醇浓度90%,在此条件下,多糖得率的理论值为2.944%,实际得率为2.938%;通过理化性质、紫外及红外光谱分析,证明提取物为多糖并推测可能是一种α-吡喃葡聚糖;苯酚-硫酸法测得多糖含量为65.3%。
以Vc为对照,考察了0.1~10 mg/mL的竹笋多糖对羟基自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-·)、过氧化氢(H2O2)的清除效果及其脂质过氧化(LPO)抑制活性。结果显示,竹笋多糖对O2-·和H2O2的清除能力较强,高于同浓度的Vc;对清除·OH和抑制LPO的作用弱于Vc。由此表明,竹笋多糖具有较强的体外抗氧化活性。
以注射等体积的灭菌生理盐水为对照,以1、5、10和20 mg/kg体质重的竹笋多糖对中华绒螯蟹进行体腔注射,在注射后第1、4、7、10d采样,进行一系列免疫学相关指标的测定,并在注射多糖后的第4d,从每个处理组中取蟹6只,以1.2×107cfu/kg体质重的剂量体腔注射接种中华绒螯蟹致病性嗜水气单胞菌CL99920菌株,记录接种7d后各组蟹的累积死亡率。结果显示:注射适量的竹笋多糖能显著地增加中华绒螯蟹的血细胞总数(THC)和血细胞吞噬活性,显著地增强血清酚氧化酶(PO)、过氧化物酶(POD)和溶菌酶(LSZ)活性及肝胰腺一氧化氮合酶(NOS)活性,血清和肝胰腺超氧化物岐化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)活性和总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05);对血细胞呼吸爆发活性(O2-产量)没有显著影响(P>0.05);在本试验条件下,竹笋多糖能明显增强中华绒螯蟹对嗜水气单胞菌的抗感染能力;从整体上看,以10 mg/kg剂量的效果较佳。