抗坏血酸对乳酸脱氢酶抑制作用的动力学研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:toerrisme
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为了探讨抗坏血酸对乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响及其动力学机制,该试验在25℃、101.3kPa条件下分别LDH<,1>和LDH<,5>催化的乳酸-丙酮酸方向和丙酮酸-乳酸方向的酶促反应.实验中采用分光光度法追踪酶反应测定反应初速度,用Lineweaver-Burk作图法及非直线回归法分析动力学机制.得出如下结论:1.抗坏血酸对LDH<,1>和LDH<,5>都具有抑制作用且抑制机制相同;2.对于辅酶NADH和NAD<+>,抗坏血酸是LDH的反竞争性抑制剂;对于底物乳酸和丙酮酸,抗坏血酸是LDH的竞争性抑制剂;抗坏血酸竞争结合于E-NADH和E-NAD<+>二元复合物并与之形成死端三元复合物,从而抑制了酶的催化效率.3.E-NADH-抗坏血酸和E-NAD<+>-抗坏血酸和E-NAD<+>-抗坏血酸三元复合物的解离常数是不同的,抗坏血酸的存在使LDH催化的乳酸与丙酮酸互变的可逆反应的平衡更倾向于丙酮酸的生成.该次实验所得出的抗坏血酸对LDH抑制作用的动力学机制,对进一步深入探讨抗坏血酸在生物体内的代谢作用会有一定帮助.
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