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中药复方是临床应用中药的主要形式,是研发的重点。中药复方有效部位群与创新药物的研究是中药现代化研究中的关键课题,中药复方创制新药为中药创新的主要途径,新可以从新物质,括新化合物和新有效部位/群或组分配伍。有效部位群药物的研制也成为中药新药研究开发的一个新领域。但是迄今为止对于中药复方有效部位群的研究及开发,无论在思路上还是在方法上都处于探索阶段,尚有很多问题有待于广泛、深入、全面的研究。前愈系临床经验方,过长达8年的研究发现对治疗慢性前列腺炎有显著的效果,但是其药效物质基础尚不明确。为了弄清楚其药效物质基础,本论文对四个化学部位(总多糖,总生物碱,总黄酮,总皂苷)进行提取纯化并进行含量测定,同时进行体外活性筛选,研究复方中各个化学部位主要起何作用。 本论文主要分为三个章节,内容如下: 第一章主要介绍中药复方“前愈”提取纯化各个化学部位的方法。先用溶剂法提取分离各个部位,再对总生物碱部位采取反复“酸溶碱沉氯仿萃”的方法进行纯化,对总黄酮部位采用聚酰胺树脂纯化,对总皂苷部位采取大孔树脂梯度洗脱的方法纯化,对总多糖部位采取反复“水溶醇沉”的方法进行纯化。 第二章主要介绍总生物碱,总皂苷,总黄酮,总多糖各个化学部位的含量测定方法与结果。对总生物碱部位采取酸性染料比色法显色后,应用紫外分光光度法和高效液相色谱法,分别测定提取分离液及纯化液中总生物碱及盐酸小檗碱的含量。结果显示溶剂法提取分离所得总生物碱含量为2.066%,盐酸小檗碱含量为1.59%;纯化后总生物碱含量为46.52%,盐酸小檗碱含量为13.98%,表明本实验确定的分离纯化方法操作简便合理,可显著提高“前愈”复方中总生物碱及盐酸小檗碱的含量。对总皂苷部位采用香草醛乙酸-高氯酸显色后应用紫外分光光度法测定提取分离液及纯化液中总皂苷的含量。结果显示溶剂法提取分离所得总皂苷含量为9.46%;纯化后总皂苷含量为50.11%,表明本实验确定的分离纯化方法操作简便合理,可显著提高“前愈”复方中总皂苷的含量。对总黄酮部位应用紫外分光光度法测定提取分离液及纯化液中总黄酮的含量,结果显示溶剂法提取分离所得总黄酮含量为8.86%;纯化后总黄酮含量为57.04%,表明本实验确定的分离纯化方法操作简便合理,可显著提高“前愈”复方中总黄酮的含量。对总多糖部位采用浓硫酸-苯酚显色后应用紫外分光光度法测定提取分离液及纯化液中总多糖的含量,结果显示溶剂法提取分离所得总多糖含量为2.82%;纯化后总多糖含量为67.8%,表明本实验确定的分离纯化方法操作简便合理,可显著提高“前愈”复方中总多糖的含量。 第三章主要介绍将总生物碱,总多糖,总皂苷,总黄酮四个化学部位进行体外活性筛选,发现起镇痛效果主要是黄酮部位,生物碱部位和多糖部位起协同作用;起抗炎作用主要是黄酮部位,多糖部位起协同作用;起活血化瘀作用主要是皂苷部位,生物碱部位和多糖部位起协同作用;起增强免疫力作用主要是多糖部位。