【摘 要】
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研究目的在大鼠背部设计超长任意皮瓣模拟缺血皮瓣模型,通过设置水蛭素组和对照组对皮瓣进行不同的干预,比较两组皮瓣成活面积及光镜显微镜下两组皮瓣微血管的数量、组织结构层次及炎性细胞浸润情况,同时利用Micro-CT及三维重建技术再现皮瓣微循环网络,观察并利用机器自带软件测量两组皮瓣血管生成的情况,从微观及直观的角度探讨天然水蛭素对大鼠缺血皮瓣血管生成的影响。实验方法选取32只健康成年SD大鼠,雌雄不限
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研究目的在大鼠背部设计超长任意皮瓣模拟缺血皮瓣模型,通过设置水蛭素组和对照组对皮瓣进行不同的干预,比较两组皮瓣成活面积及光镜显微镜下两组皮瓣微血管的数量、组织结构层次及炎性细胞浸润情况,同时利用Micro-CT及三维重建技术再现皮瓣微循环网络,观察并利用机器自带软件测量两组皮瓣血管生成的情况,从微观及直观的角度探讨天然水蛭素对大鼠缺血皮瓣血管生成的影响。实验方法选取32只健康成年SD大鼠,雌雄不限,体质量为300±10g,以双侧髂棘连线为底边、后正中线为轴设计一个大小8.0 cm×1.8 cm的超长随意皮瓣,按手术先后顺序编号,然后按随机数字表法将大鼠随机分为水蛭素组和对照组,每组各16只,两组大鼠均在后正中线上距离底边分别为2cm、4cm、6cm处分别标记三个点,水蛭素组大鼠在术后即刻和术后3日内在上述各点每天皮下注射天然水蛭素0.1ml,每只大鼠每次共注射0.3 m L（含天然水蛭素6 ATU）,对照组大鼠在术后即刻和术后3日内每天每个点皮下注射生理盐水0.1ml,每次共计0.3 m L。术后6 d,大体观察皮瓣,数码相机以固定焦距拍照大鼠背部,将图片输入电脑,利用Image Pro-Plus6.0软件（Media Cybernetics公司,美国）测定皮瓣成活率（计算方法为皮瓣成活面积除以皮瓣总面积乘以百分之百）,随机选取部分大鼠取材行HE染色,光镜显微镜下观察皮瓣组织学变化并计数微血管的数量,再随机选取部分大鼠行心脏主动脉穿刺依次灌注10 U/m L肝素钠盐水、4%多聚甲醛及5%明胶氧化铅混合液,经冷冻后行Micro-CT检测并三维重建观察并测量皮瓣血管容积、长度及数量。实验结果术后两组大鼠均存活至实验完成,无感染发生。术后6 d,两组皮瓣远端均发生不同程度坏死,水蛭素组皮瓣坏死程度较对照组轻,皮瓣成活率明显高于对照组（P<0.05）。组织学观察示水蛭素组较对照组组织结构层次更清楚,有较多微血管生成,炎症反应及炎性细胞浸润相对更轻。Micro-CT三维重建示水蛭素组皮瓣血管更多、更加密集,血管容积、长度及数量均显著大于对照组（P<0.05）。结论天然水蛭素可减轻组织炎症反应、促进缺血皮瓣血管的再生与再通,从而提高皮瓣成活率。
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