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背景血管内皮细胞凋亡促进动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)的形成,引起一系列心血管疾病,成为人类健康的巨大威胁。微小RNA-133a(microRNA-133a,miR-133a)是一类非编码RNA,其参与AS病理过程,然而具体的分子机制不详。中药红景天苷(Salidroside,SAL)具有显著抗AS作用,药理机制至今尚不明了。目的1.探讨miR-133a参与内皮细胞凋亡过程,将为非编码RNA调控内皮损伤的病理机制研究提供可参数据。2.研究红景天苷抑制内皮细胞凋亡并探究其分子机制,为中医药防治动脉粥样硬化提供新途径和靶点。方法1.培养人冠状内皮细胞(Human coronary endothelial cells,HCAECs)给予氧化低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)处理,MTT 法检测细胞活力、qRT-PCR 检测 miRNA(miR-133a 等)及 Bcl-xl 的 mRNA水平、蛋白质印迹(Western Blot)检测抗凋亡蛋白Bcl-xl及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase 3)表达量、流式细胞仪检测细胞凋亡率。采用瞬时转染技术过表达和沉默miR-133a,观察其对靶基因Bcl-xl蛋白表达及内皮细胞凋亡的影响。2.培养HCAECs给予SAL处理,MTT法检测细胞活力,乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)释放试验检测细胞毒性。在ox-LDL诱导的HCAECs凋亡模型中,加入SAL进行干预,qRT-PCR检测miR-133a及Bcl-xl的mRNA水平、Western Blot检测抗凋亡蛋白Bcl-xl及cleaved-caspase 3表达量、流式细胞仪检测细胞凋亡率。瞬时转染技术过表达及沉默miR-133a分为:mimics+ox-LDL 组、mimics+ox-LDL+SAL 组及 inhibitor+ox-LDL 组、inhibitor+ox-LDL+SAL组,进一步检测细胞凋亡及Bcl-xl蛋白表达情况。结果1.ox-LDL可降低HCAECs细胞活力并诱导HCAECs凋亡;细胞凋亡模型中miR-133a异常增高;过表达miR-133a,Bcl-xl降低,细胞凋亡率增加;沉默miR-133a后,ox-LDL诱导的Bcl-xl降低及细胞凋亡率的增高均被部分逆转,差异具有统计学意义。2.ox-LDL诱导HCAECs中miR-133a增高、抗凋亡蛋白Bcl-xl降低及caspase 3活化,SAL干预后均可被逆转;沉默miR-133a后SAL抗凋亡作用减弱,过表达miR-133a后SAL抗凋亡作用得到部分恢复,差异具有统计学意义。结论1.miR-133a调节抗凋亡蛋白Bcl-xl,引起内皮细胞凋亡。2.SAL可抑制ox-LDL诱导的miR-133a增高,促进抗凋亡蛋白Bcl-xl的表达,阻止内皮细胞凋亡,保护血管功能,抗AS。