目的： 在家系调查的基础上，运用PCR、限制性酶切、dHPLC分析和DNA测序等方法检测mtDNA突变及突变率，探讨mtDNA突变与LHON发病、预后的关系。 材料方法： 收集来自中国河南的7个LHON家系(包括母系成员101人)，进行家系调查，抽取先证者外周静脉血样2.00～4.00 ml。蛋白酶K裂解和酚—氯仿抽提法提取基因组DNA，基因测序确定各家系LHON线粒体突变位点。构建携带正常位点线粒体基因片段和突变位点基因片段的重组质粒，包括正常及突变的3460和11778位点的基因片段，培养4种携带重组质粒的细菌克隆。分别用携带同一位点的正常和突变基因片段的质粒，混合成不同比例，PCR扩增，应用限制性内切酶酶切后，采用dHPLC 50℃非变性模式进行梯度洗脱，构建各个峰线下百分比面积的比值与mtDNA突变率的拟合曲线。在此基础上，对母系成员及家系内对照目的基因片段进行PCR扩增，得到每一个样本的线粒体突变率。SPSS统计软件分析线粒体突变率与LHON的外显率、视力之间的关系。 结果： 1．7个临床确诊的LHON家系中，5个携带点突变G11778A，1个携带点突变G3460A，另一个家系不携带G3460A、G11778A和T14484C三个突变中的任何一个。