环境胁迫对灰飞虱带毒率的影响及防治条纹病毒疫苗的研制

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水稻条纹病毒(RSV)是由灰飞虱传播的一种病毒,该病毒造成的水稻条纹叶枯病是近几年我国水稻上分布最广、发生量较大、为害较重的病害之一。本文利用斑点免疫结合检测法(DIBA)和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术研究了不同环境胁迫下灰飞虱体内带毒率的变化,并初步研制出一种对RSV有良好抑制作用的生物导弹—“疫苗”。主要研究结果如下:将带毒灰飞虱在17℃、21℃、25℃、29℃、33℃温度条件下分别处理10天、20天、40天后,采用斑点免疫结合检测法(DIBA)检测灰飞虱体内的带毒变化情况。结果表明,在17℃较低温度范围内,灰飞虱的带毒率基本保持稳定,没有明显变化;随着温度的升高,灰飞虱的带毒率有明显下降趋势,而且温度越高带毒率下降越明显。究其原因是高温缩短了灰飞虱的生长发育周期,加剧了灰飞虱带毒率的下降速率。通过气室法模拟大气CO2浓度,研究了370ppm、470ppm、570ppm等CO2浓度条件下灰飞虱体内带毒的变化情况。结果表明:CO2浓度的升高可显著影响灰飞虱体内的带毒率,且随着CO2浓度的升高,灰飞虱体内的带毒率呈明显下降趋势。采用RT-PCR技术检测带毒灰飞虱在水稻植株上取食7个不同时间段后水稻植株的获毒情况。结果表明,当带毒灰飞虱在水稻上取食3小时后,能够将病毒有效地传入到稻株体内,且带毒灰飞虱取食时间越长,稻株体内的获毒概率越大;采用斑点免疫吸附法(DIBA法),检测非带毒灰飞虱在有毒稻株上取食6个不同时间段后的获毒情况。结果表明,当非带毒灰飞虱在感染了条纹病毒的稻株上取食0.5小时后就能顺利获毒,而且随着取食时间的延长,灰飞虱获毒的概率越大。通过深化研究,本课题组创制了一种抑制条纹病毒(RSV)增殖的新型生物药剂—生物导弹(“疫苗”)。通过筛选试验并添加一定浓度的渗透剂,借助喷雾技术使其进入稻株体内,有效地降解了RSV的CP、SP基因,较好地抑制了条纹病毒的增殖。结果表明:对条纹病毒的降解效果基本达到100%,保证了稻株不发病。
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