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目的：证实电针刺激足三里穴位对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimentalautoimmune encephlomyelitis，EAE)治疗作用，通过体内、体外实验深入探讨电针治疗EAE的作用机制。
方法：1、电针对EAE大鼠的治疗作用将免疫大鼠随机分为四组：用完全弗氏佐剂免疫组(CFA组)；用MBP68-46多肽与完全弗氏佐剂免疫组(EAE组)；用MBP68-86多肽免疫后的大鼠电针刺激足三里穴位组(electroacupuncture group，EA组)和用MBP68-86多肽免疫后的大鼠电针刺激非穴位组(non-electroacupuncturegroup，NA组)。连续21天观测各组大鼠体重和临床评分情况；分别于免疫后第7天，14天和21天取取脊髓和淋巴结：取脊髓切片分别进行HE染色和LuxolFast Blue染色，观察淋巴细胞浸润情况和脱髓鞘情况；CCK-8法检测各组淋巴细胞对特异性MBP多肽的增殖活性：流式细胞仪检测T淋巴细胞中Th1、Th2、Th17及Treg四种亚型的比例；采用ELISA方法检测淋巴细胞培养上清中IFN-γ和IL-4、IL-17和TGF-β细胞因子水平。
2、电针对EAE大鼠的治疗机制用MBP68-86多肽与弗氏佐剂、结核菌素的混合液免疫Lewis大鼠，建立EAE动物模型。连续21天观测CFA组，EAE组，EA组和电针刺激足三里穴位后静脉注射纳洛酮组(naloxone group，NAL)组各组大鼠体重和临床评分情况；于免疫后第14天取淋巴结淋巴细胞通过增殖实验检测淋巴细胞对特异性MBP多肽的增殖活性；免疫组织化学方法检测β-内啡肽(β-endorphin，β-EP)在脾组织中的表达；β-EP体外干预淋巴细胞，探讨β-EP对T细胞增殖、亚型分布的影响；分别于免疫后第7天，14天和21天采集实验大鼠血浆通过125I放射免疫分析法检测β-EP和促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic，ACTH)表达情况。
结果：1、电针对EAE大鼠的治疗作用EA组中的大鼠与EAE组相比症状相对较轻，第14到16天有明显区别(P<0.05)；第2天到第4天和第12到第17天，EA组体重明显高于EAE组(P<0.05)；H&E染色结果，EA组与EAE组相比，炎细胞浸润较轻，采用半定量分析法检测炎细胞浸润数，EAE组为(20.8±5.4)，EA组为(5.0±3.2)，两组之间有明显区别(P<0.01)；luxol fastblue染色结果显示，EAE组有多处的脱髓鞘斑块，EA组有小范围的脱髓鞘斑块；用特异性抗原MBP刺激的淋巴细胞结果显示：EAE组与EA组相比，淋巴细胞增殖明显，差异显著(P<0.05)；ELISA法检测淋巴细胞培养上清，结果显示：EA组与EAE组相比IL-4水平有所升高(P<0.001，P<0.01，P<0.05)；IFN-γ表达量在第14天和第21天EA组明显低于EAE组(P<0.001，P<0.05)；IL-17在三个时间点EA组均明显低于EAE组(P<0.01，P<0.01，P<0.01)；TGF-β只在第14天EA组明显高于EAE组(P<0.01)；流式细胞分析术分析Th细胞亚型，结果显示：EA组与EAE组相比Th1和Th17细胞亚型所占比例明显减少，而Th2和Treg细胞亚型所占比例有所升高。
2、电针治疗EAE的机制EA组中的大鼠与EAE组相比症状相对较轻，体重较高，而NAL组与EAE组相比没有明显区别，无统计学意义：用特异性抗原MBP刺激的淋巴细胞增殖实验显示：EAE组与EA组相比淋巴细胞增殖明显(P<0.05)，与NAL组相比无显著差异；在EAE组外源性加入不同浓度的β-EP后，T细胞对MBP68-86肽段的增殖能力明显下降，与不加β-EP组相比差异显著(P<0.05，P<0.01)，在加入naloxone后，β-EP对T细胞增殖抑制能力被逆转；β-EP在EA组大鼠脾组织中高表达，但在EAE组中表达量相对较低；第14 d和21 d，血浆和下丘脑中EA组β-EP含量均显著高于EAE组(P<0.05)；流式细胞分析术分析β-EP对Th细胞亚型分化的影响：β-EP组与EAE组相比，EA组CD4+表达IFN-γ和IL-17的T淋巴细胞数目明显减少，naloxone对以上变化有逆转作用；β-EP组与EAE组相比，CD4+表达IL-4和Foxp3的T淋巴细胞数目未见明显变化；血浆和丘脑中，EA组与EAE组相比，第7d、第14 d和21d ACTH含量均显著升高(P<0.05，P<0.01)。
结论：1、电针刺激足三里穴位对EAE有治疗作用，可以纠正Th1/Th2，Th17/Treg细胞比例的失衡，同时降低炎症细胞因子的产生，促进抗炎细胞因子的生成，并对特异性T细胞的增殖能力有抑制作用；2电针刺激EAE大鼠足三里穴位后，可以促进β-EP和ACTH的释放，是纠正Th细胞亚群的失衡，从而对EAE大鼠起到治疗作用主要原因之一。