【摘 要】
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【目的】对透脓散复方水煎液有效成分进行指认,并通过对大鼠结肠病理形态、肠道及血清中炎症因子水平等指标的观察评价透脓散对TNBS诱导的克罗恩病(CD)大鼠的治疗效果并在此基础上探索其作用机制,为临床应用透脓散治疗炎症性肠病提供实验依据。【方法】药效学方面,本研究采用60只体重200±20g的SPF级SD雄性大鼠,饲养于22℃±3℃,湿度60%±10%的动物房中,禁食24h后以100mg/kg的剂量通
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【目的】对透脓散复方水煎液有效成分进行指认,并通过对大鼠结肠病理形态、肠道及血清中炎症因子水平等指标的观察评价透脓散对TNBS诱导的克罗恩病(CD)大鼠的治疗效果并在此基础上探索其作用机制,为临床应用透脓散治疗炎症性肠病提供实验依据。【方法】药效学方面,本研究采用60只体重200±20g的SPF级SD雄性大鼠,饲养于22℃±3℃,湿度60%±10%的动物房中,禁食24h后以100mg/kg的剂量通过直肠灌肠给药TNBS+无水乙醇混合溶液诱导CD模型,造模后随机分为空白对照组,模型组,阳性药物组,透脓散低剂量组,透脓散中剂量组,透脓散高剂量组,灌胃7天。每日观察大鼠一般情况并记录每日饮食饮水量和体重变化,第8天取材后分离其血清进行离心并取其上清液,采用酶联免疫吸附法检测TNF-α,IL-6,IL-β和IL17的浓度。分离其结肠组织并进行宏观和微观的组织学评分,RT-PCR法检测结肠组织TNF-α,IL-6,IL-β和IL17的mRNA的含量,用免疫印迹法检测结肠组织中IKK激酶,IKB蛋白,p65的含量。【结果】(1)本实验优化了透脓散指纹图谱的实验条件,并对透脓散中的主要成分进行了指认,其主要成分为:毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素、阿魏酸、洋川芎内酯I。(2)与空白组相比,造模各组大鼠体重,饮食及饮水量显著下降。HE染色及相应评分显示,阳性药组及透脓散各组能显著改善CD大鼠结肠的病理学形态,减少上皮损伤及粘膜下炎性浸润。(3)组织及血清炎症因子水平方面,与空白组相比,模型组大鼠水平显著升高(P<0.01),阳性药组及透脓散各组能显著改善组织及血清中的炎症因子水平(P<0.05)。(4)机制研究方面,与空白组相比,模型组细胞核中p65水平显著升高,IKB蛋白明显降低,细胞中的IKK激酶明显升高,证明了其炎症通路在实验过程中被激活,透脓散各组干预后细胞核内的p65水平和细胞中的IKK激酶明显下降,IKB蛋白水平显著升高。【结论】(1)透脓散能显著抑制TNBS诱导的CD大鼠的肠道炎症,改善其组织病理形态,降低组织及血清中的炎症因子水平。(2)透脓散对CD大鼠炎症的改善可能同其抑制NF-κB通路的活性有关系。
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