本研究是按OIE及欧盟标准鉴定中国分离的鸡传染性法氏囊病超强毒（vvIBDV）Gx株,通过致弱和分子分析研究来揭示vvIBDV毒力变异的分子基础。 本研究成功地将vvIBDV Gx株通过SPF鸡胚和鸡胚成纤维细胞传代致弱,揭示了vvIBDV Gx株由超强毒向弱毒转化过程中,主要结构蛋白VP₃基因和非结构蛋白VP₅基因核苷酸及推导的氨基酸序列的变异规律。对经细胞传代的不同代次病毒进行了基因序列分析,发现病毒经细胞传代至第7代（CEF-7）之前,VP₃基因序列没有改变,在CEF-8的VP₃基因只有一些核苷酸的改变,没有氨基酸的替代,氨基酸序列与参考株vvIBDV HK46的同源性为99.6%。而CEF-9的VP₃基因核苷酸序列发生了很多变化,并且出现一些氨基酸的替代。在CEF-10到CEF-20之间的各代次的VP₃基因的序列没有发生改变,已基本保持稳定,与参考的弱毒株P2的氨基酸序列同源性达100%;CEF-10的VP₃基因在28H,163E,226P,235V和250A分别变为Q,D,L,A和T,发生变异的代次是CEF-9,并且28H也是Gx毒株所特有的。在CEF-7之前,VP₅基因序列未发生改变,在CEF-8的VP₅基因只有几个核苷酸的改变,没有氨基酸的替代,氨基酸序列与HK46的同源性为98.7%。而CEF-9的VP₅基因核苷酸序列发生了很多变化,并且出现一些氨基酸的替代。在CEF-10到CEF-20之间的各代次的VP₅基因的序列没有发生改变,已基本保持稳定,与P2的氨基酸序列同源性达99.3%,CEF-10的VP₅基因在18E,49R,78F,91E,104G,122Y,129P和137W分别变为K,G,I,G,C,H,S和R,发生变异的代次也是CEF-9,并且104G和122Y也是本毒株所特有的。从而我们得出结论,病毒在传代致弱过程中,强弱毒之间的转变发生在CEF-8至CEF-10之间,通过这一中间代次的过渡,VP₂,VP₃和VP₅最终由具备vvIBDV分子特征转变成为具备与其他弱毒株相似的分子特征,毒力变异的总趋势是毒力逐渐变弱的,最终变成弱毒株,所形成的弱毒分子特征自CEF-10代次后保持稳定。VP₃的1个氨基酸和VP₅的2个氨基酸是Gx株所特有的,这为各个强弱毒株间的鉴定提供了很好的依据。 致病性试验表明,原代毒对4周龄SPF鸡致死率达64%;CEF-5、CEF-8致死率达60%,仍为超强毒;从CEF-9代病毒的致病性开始降低,致死率为28%,而CEF-10、CEF-15和CEF-20是无致病性的,这也表明CEF-9是病毒发生转变的过渡代次。返强试验表明,CEF-20在鸡体内传6代不返强,表明该弱毒株表现出很好的稳定性。VN实验表明,病毒在CEF细胞传代的过程中,其抗原性没有发生显著的改变。 进一步对CEF-9的分子生物学及生物学特性进行了研究,结果表明其VP₃和VP₅基因序列既具有超强毒的特征,又兼有部分致弱毒的特征,其致病性介于超强毒株和致弱株之间;在体内外均不稳定,体外继续传代可进一步致弱,回归体内毒力可迅速返强。