雄黄为矿物类中药，主要成份为二硫化二砷(As2S2)，其功能为解毒杀虫，燥湿祛痰，截疟，中医主治痈肿疔疮，蛇虫咬伤，虫积腹痛，惊痫，疟疾，因而广泛用于复方中药和中成药中。现代药理证明雄黄具有抗肿瘤、镇痉、止痛、杀虫、抗菌等功效。长期以来中医认为雄黄有毒，内服宜慎，不可久用，孕妇禁用，因此雄黄一直作为有毒中药一直受到药政部门的严格控制，列在72种有毒中药之内。但是至今为止，中医中药和西医西药都对雄黄的毒性认识不充分，特别是运用现代毒理学技术进行研究的报道甚少。为了探讨雄黄的毒性，根据《药物生殖毒性研究技术指导原则》和《药物遗传毒性研究技术指导原则》(第二稿)进行了雄黄口服给药对孕大鼠母体和胚胎-胎仔发育的毒性研究以及遗传毒性的研究。　　 1、口服雄黄对胚胎-胎仔的发育毒性研究　　 方法:　　 雌性SD大鼠交配后随机分成雄黄高、中、低剂量组、阳性对照组和阴性对照组6组，妊娠第6天至第15天每天1次，连续灌胃10天。环磷酰胺组在妊娠第十天一次性腹腔注射。于妊娠第20天处死、解剖，观察母体的脏器病变，采血分离血清做肝肾功能，骨髓涂片观察骨髓增生情况，取主要脏器做病理组织学检查；剪开子宫，观察并记录活胎数、死胎数(含吸收胎)、畸胎数、胎仔总重、胎盘重量、胎盘外观、胎仔性别、重量、顶臀长及外观、内脏、骨骼，并计算着床数。每胎取1/2胎仔固定于Bouin液中，做内脏检查；另1/2胎仔剥去皮肤，取出内脏和脂肪，用75％酒精固定后放入茜素红液中染色，观察骨骼畸形情况。　　 结果:　　 1、雄黄高、中、低剂量组孕鼠在给药前后体重增长和摄食量方面和阴性对照组比较均无明显差异。雄黄高剂量组的肝肾功能检查未见异常，骨髓涂片显示骨髓细胞妊娠的正常增生；病理组织学检查显示雄黄各剂量组未见明显的毒性病理学改变。　　 2、胎仔检查发现，雄黄3个剂量组对胚胎形成及胎鼠一般生长发育及外观生长发育指标无明显影响。其妊娠率、子宫连胎重及胎盘总重、平均黄体数、平均着床数、每窝活胎数(率)、每窝死胎数(率)、吸收胎数(率)、晚期胚胎流失率等各项指标均与阴性对照组无显著差异(P>0.05)。雄黄3个剂量组对胎鼠外观形态、内脏和骨骼畸形无明显影响，畸胎率、内脏畸形率和骨骼畸形率为0，与阴性对照组比较差异无显著意义。　　 3、阳性对照乙酰水杨酸组和环磷酰胺组对孕鼠体重、胚胎形成和胎鼠的生长发育、外观、骨骼、内脏发育均有明显影响，主要表现:为孕鼠体重增长缓慢(或减轻)，吸收胎、死胎、着床前丢失显著增多，孕鼠子宫连胎重、胎盘总重、胎鼠体重、身长、尾长等指标值显著减小，并出现露脑、脊柱裂、腹腔外露、侧脑室扩大、腭裂、颅顶骨缺损、囟门过大、胸骨缺损或骨化迟缓、多肋、融合肋、尾椎骨化迟缓等胎鼠外观、内脏及骨骼畸形或变异。与阴性对照组比较，阳性对照组出现了较强的胚胎一胎仔发育毒性。　　 结论:　　 妊娠大鼠从妊娠第6-10天连续10天分别每天经口给予批号为H2006061612雄黄170mg/kg、85mg/kg和42.5mg/kg，对孕鼠体重、摄食量、肝肾功能、骨髓增生以及各重要脏器的病理组织学无明显影响，对胚胎形成和胎鼠的一般生长发育等观察指标均无明显影响，各组胎鼠也均未出现明显的外观、骨骼、内脏畸形或异常，与阴性对照组相似，表明在人临床拟用剂量上限100倍条件下，批号为H2006061612雄黄对孕鼠母体及胚胎-胎仔发育无明显的毒性反应。　　 本文将进一步用雄黄对非啮齿类动物进行胚胎-胎仔发育的毒性研究，以进一步证明雄黄对致畸敏感期的毒性作用。　　 2、雄黄的遗传毒性试验研究　　 根据《药物遗传毒性研究技术指导原则》(第二稿)推荐的标准组合，对雄黄进行了组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门杆菌回复突变试验(Ames试验)、CHL细胞染色体畸变试验和小鼠骨髓细胞微核试验。　　 方法:　　 1、Ames实验　　 应用组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门杆菌TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535五个菌株，在顶层培养基中分别加入雄黄含药血清、阴性对照品及阳性对照品，在加S9和不加S9的情况下，37℃培养48小时，计数每平皿回变菌落数。回变菌落数凡高于阴性对照2倍以上者即为阳性结果。　　 2、CHL细胞染色体畸变试验　　 在培养的CHL细胞培养皿内分别加入雄黄含药血清、阴性对照品及阳性对照品，在加S9和不加S9的情况下，给药后24小时和48小时分别收获细胞。制作染色体标本。观察200个中期相细胞染色体畸变情况。以染色体畸变率<5％为阴性(-)；畸变率5-9％为可疑(±)；畸变率10-19％为阳性(+)；畸变率≥20％为强阳性(++)。　　 3、小鼠骨髓细胞微核试验　　 ICR小鼠随机分成雄黄高、中、低剂量组、阳性对照组和阴性对照组5组。阳性组一次性腹腔注射环磷酰胺后24小时取骨髓制作骨髓涂片，其余各组在第二次给药后24小时取骨髓制作骨髓涂片。吉姆萨染色后观察2000个含有微核的嗜多染红细胞数，计算微核率。观察嗜多染红细胞与总红细胞( PCE/RBC)的比值，计数200个总红细胞(嗜多染红细胞(PCE)和正染红细胞(NCE)总和)，求出PCE/(PCE+NCE)比值。根据统计学分析，结合量效关系等，评价受试药物是否具有遗传毒性。　　 结果:　　 1、Ames试验结果显示，第1次试验中雄黄三个剂量组五种菌株中的TA98(高剂量)和TA1535(高、低剂量)两种菌株的回变菌落数略高于自发回变菌落数的两倍，而第2次试验中雄黄各剂量组的五种菌株的回变菌落数均低于各菌株自发回变菌落数的两倍。　　 2、染色体畸变试验中，雄黄三个剂量组药物作用24小时和48小时后与阴性组相比无显著性差异，阳性对照组则表现出显著的致畸变作用。　　 3、骨髓微核试验阴性组的微核率为1.92‰，阳性组为17.33‰，雄黄三个剂量组分别为3.08‰，3.17‰，和4.50‰。雄黄低剂量和中剂量组与阴性组相比没有显著性差异，而高剂量组和阳性组与阴性组相比有显著性差异。　　 结论：　　 根据上述Ames试验、CHL细胞染色体畸变试验和小鼠骨髓细胞微核试验结果来看，除了CHL细胞染色体畸变试验为阴性外，Ames试验中第1次试验有两种菌种的回变菌落数略高于自发回变菌落数的两倍，小鼠骨髓细胞微核试验(体内试验)中雄黄高剂量组微核率高于阴性对照组(P<0.05)，不能完全排除雄黄对染色体的损伤作用，需要进一步重复实验，或增加小鼠淋巴瘤tk试验来判断雄黄的遗传毒性。由于我们所用的试验剂量是人临床用量的10000倍以上，因此在人临床用量的情况下，雄黄可能并不具有遗传毒性。