白及内生菌的分离与鉴定

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白及是兰科白及属,具有重要的观赏和药用价值。其块茎具有止血润肺、生肌止痛、保护组织和修补破损组织等功效,临床上用于治疗外伤出血、吐血、疮疡和溃疡等病症。随着近年人们对白及认识的不断加深,用途不断扩大,白及市场价格攀升。野生白及被乱采滥挖,其资源不断受到破坏,导致野生资源急剧缩减,面临着灭绝的危险。白及又因种子发育不完全且极其细小,很难播种出苗,现在在生产上大都以块茎进行繁殖,其繁殖系数较低。所以白及资源紧缺,市场供不应求,怎样有效地进行人工栽种和繁殖成了急需解决的问题。目前,虽然已实现白及人工栽培,但其繁殖栽培措施并不理想。而内生菌是普遍存在于植物中的一类重要的微生物资源,一些内生菌在植物生长发育中起着重要作用。白及内生菌与白及生长的关系以及白及药用成分的关系还少有报道。这些研究的前提是内生菌的分离鉴定。基于此,我们开展了这方面的研究。本研究实验材料白及(Bletilla striata)取自重庆市药用植物种植研究所内的白及种植园区。将新鲜的白及植株带回实验室,选取生长健康的白及洗净,将其根、茎块、茎、叶4个部分的组织块,经75%的酒精和0.1%的升汞表面消毒后,分别接于PDA、MEA(麦芽糖培养基)、CS(察氏培养基)、LB培养基上。研究表明,从组织块中共分离到内生真菌菌株71个,内生细菌菌株23个。其中从根、叶、茎和茎块中分别分离到内生真菌菌株6个、20个、20个和25个。经形态学和分子生物学鉴定后,一共鉴定出了19种内生真菌,包含在10个属中。对白及内生细菌进行抗菌活性实验后,发现一株内生细菌(b9)对芽孢杆菌和大肠杆菌都具有抗菌活性。
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