大叶桉对四种蕨类植物孢子萌发和配子体发育的影响

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大叶桉(Eucalyptus robusta Smith)原产于澳大利亚,其生长快速、适应性强,木材坚硬、抗腐蚀能力强,在制浆、建筑、家具、农具、碳材等方面具有较高的经济价值,叶具有祛风镇痛的药用价值,因此,近几年在中国的广西、云南、四川等地都有大量的人工栽培。
  植物化感作用是将植物产生的化学物质释放到环境中,直接或间接地对其他植物产生有利或有害影响。桉树类植物对其周围植物具有比较强的化感作用,致使其林下植被稀少。
  蕨类植物是构成森林下层的主要植物之一,具有保持水土、美化环境的作用。蕨类植物具有易繁殖、生长周期短的优点,但其配子体发育过程是蕨类植物生长发育过程中相对脆弱的环节,最易受化感作用影响,因此,加强相关的繁殖技术以及外界环境对蕨类植物影响的研究具有重要的研究价值和现实意义。目前,有关大叶桉对蕨类植物化感作用影响的研究很少,本文主要研究大叶桉对蕨类植物孢子萌发和配子体发育的影响,旨在为大叶桉对林下植物的影响研究提供进一步的参考。
  以华南鳞毛蕨(Dryopteris tenuicula Matthew et Christ)、狗脊(Woodwardia japonica(L.f.)Sm.)、蜈蚣草(Pteris vittata L.)和肿足蕨(Hypodematium crenatum(Forssk.)Kuhn)为受体植物,以改良的Knop’s营养液滤纸桥液体无菌培养作为对照组、大叶桉树不同部位四种浓度的水浸提液滤纸桥液体无菌培养为四组实验组。用滤纸桥液体无菌培养法培养四种蕨类植物的孢子,通过观察四种蕨类植物的孢子萌发和配子体发育情况,来研究大叶桉对这四种蕨类植物孢子萌发和配子体发育的化感作用。
  对照组对四种蕨类植物孢子的滤纸桥液体无菌培养中,四种蕨类植物的配子体发育特征如下:华南鳞毛蕨孢子萌发类型为书带蕨型,原叶体发育类型为三叉蕨型,配子体发育过程中有毛状体产生;狗脊孢子萌发类型为书带蕨型,原叶体发育类型为三叉蕨型,配子体发育过程中有毛状体产生;蜈蚣草孢子萌发为书带蕨型,配子体发育为水蕨型,原叶体发育过程中无毛状体产生;肿足蕨孢子萌发类型为书带蕨型,原叶体发育为三叉蕨型,配子体发育过程中无毛状体产生。
  在对照组和四组实验组对四种蕨类植物孢子的滤纸桥液体无菌培养中,以蕨类植物孢子萌发、配子体各发育阶段出现的时间为观察指标,实验发现四组实验组对这四种蕨类植物的孢子萌发和配子体发育具有不同程度的化感作用,能够抑制蕨类植物的孢子萌发和配子体发育。在孢子萌发方面,实验组①和②0.05FWml-1浓度培养下的肿足蕨孢子萌发时间晚于对照组两天,萌发率分别为9.2%和8.2%;实验组②四种浓度培养下的狗脊孢子均未萌发;实验组③0.05FWml-1浓度培养下的华南鳞毛蕨孢子萌发率最高,但仍与对照组培养下华南鳞毛蕨孢子萌发率相差32%;实验组④培养下的狗脊孢子萌发率最高,为28%,实验组培养下的四种蕨类植物孢子萌发率明显低于对照组。
  在配子体发育方面,实验组①0.05FWml-1浓度培养下的狗脊、蜈蚣草、肿足蕨,实验组①0.10FWml-1浓度培养下的华南鳞毛蕨及实验组③0.05FWml-1浓度培养下的华南鳞毛蕨、狗脊的孢子都能发育形成原叶体;在未发育为原叶体的四种蕨类植物孢子中,实验组①的0.10FWml-1浓度和实验组④的0.05FWml-1浓度培养下的狗脊配子体发育到心形幼原叶体阶段停止发育;四组实验组0.20FWml-1浓度培养下的四种蕨类植物均未进入配子体发育阶段。
  四组实验组对蕨类植物孢子萌发和配子体发育的抑制作用随着水浸提液浓度的升高而增强,在四种受体蕨类植物中,四组实验组对狗脊孢子萌发的抑制作用最为明显。四组实验组对四种蕨类植物的影响研究中,实验组②对四种蕨类植物孢子萌发和配子体发育的抑制作用最为明显。
  对照组滤纸桥液体无菌培养下的蕨类植物配子体发育后的原叶体叶绿素a和叶绿素b的总含量均在30mg/L以上,在实验组①和③的滤纸桥液体无菌培养下的四种蕨类植物配子体发育后原叶体叶绿素a和叶绿素b的总含量均在25mg/L以下,明显低于对照组。说明大叶桉根和皮的水浸提液水浸提液能够抑制蕨类植物叶绿素a和叶绿素b的形成,从而影响蕨类植物的正常生长。
  大叶桉新鲜叶片的挥发油经过气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析后鉴定出了松油醇、异龙脑、(1R,5S)-rel-香芹醇、α-蒎烯、反式-1,4-环已烷二甲醇等23种主要有机成分,这些成分是符合化感物质分类标准的烷烃、烯烃、醇类、酯类、芳香烃、酮类及不饱和烃,大叶桉叶片含有的这些物质对蕨类植物有化感作用,能够抑制蕨类植物的孢子萌发和配子体发育。
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