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本文对广州地区蓝藻发生情况进行了调查,测定了四羟甲基硫酸鳞对4种主要蓝藻:铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa),水华鱼腥藻(Anabaena flos-aquae),水华微囊藻(Microcystis-flos-aquae),聚球藻7942(Synechococcus 7942)的毒力,对水华的防治效果及其安全性,并以铜绿微囊藻为代表种,系统地研究了四羟甲基硫酸鳞对铜绿微囊藻的作用方式,细胞膜通透性的刺激作用,相关关键酶的影响,重点研究了四羟甲基硫酸鏻作用下铜绿微囊藻细胞膜脂过氧化及细胞膜通透性的变化,为防控蓝藻提供参考。主要研究结果如下:
对华南植物园中心湖、广州市花都区花东镇养殖池塘、云台花园、岑村河、华南农业大学月湖等水体的浮游植物发生情况、叶绿素a含量及优势蓝藻种类进行调查。结果显示,大部分水体为蓝藻型水体,优势种主要是微囊藻(Microcystis spp.),聚球藻(Synechococcus spp.)、鞘丝藻(Lyngbya spp.)及鱼腥藻(Anabaena spp.),叶绿素a含量别为0.83、1.18、0.56、0.02、2.14 mg/m3。
四羟甲基硫酸鳞处理铜绿微囊藻、聚球藻、水华微囊藻、水华鱼腥,72 h ECso值分别为8.13、10.55、7.75、7.20 mg/L,四羟甲基硫酸鏻抑藻活性高于硫酸铜。正交试验结果表明,各种影响抑藻效果的环境因素中,处理浓度>温度>光照强度>藻液密度,最佳条件下四羟甲基硫酸鳞相对抑藻率为94.51%。
扫描电镜结果显示,四羟甲基硫酸鳞处理铜绿微囊藻,细胞肿胀,细胞表面出现不同程度凹陷;透射电镜结果表明,四羟甲基硫酸鳞处理的铜绿微囊藻,细胞膜、壁均发生不同程度的缺损;伪空泡散乱分布并最终消失;类囊体发生扭曲、断裂,细胞形态不规则改变。
抑藻机理结果显示:不同浓度四羟甲基硫酸鳞处理铜绿微囊藻,可溶性蛋白含量和酯酶活性均较对照组有显著提高。9,10,11 mg/L四羟甲基硫酸鳞处理24 h后,可溶性蛋白含量分别为13.16,13.47,13.13mg/g,较对照组提高8.14%、10.64%和7.86%;相同浓度四羟甲基硫酸鳞处理36h,二乙酸荧光素FDA( fluorescein diacetate)平均荧光强度分别为279.45、285.41、266.05,较对照组提高5.20%,7.47%,0.18%。
四羟甲基硫酸鳞能够破坏细胞膜选择通透性,引起膜脂过氧化。9,10,11 mg/L四羟甲基硫酸鳞处理12、24、36h后,PI染色采用流式细胞仪FCM(flow cytometry)测定,荧光强度显著增强,反映细胞膜通透性增强,说明四羟甲基硫酸鏻对细胞膜通透性具有刺激作用。相同浓度四羟甲基硫酸鳞处理铜绿微囊藻细胞12,24,36h,超氧化物歧化酶SOD (super oxide dimutese)、丙二醛MDA (malonic dialdehyde)、超氧自由基、过氧化氢含量较对照组均有显著提高,说明四羟甲基硫酸鳞能够引起膜脂过氧化并造成过氧化产物的积累。
四羟甲基硫酸鳞防控自然水体浮游植物的试验结果表明,四羟甲基硫酸鏻对浮游植物48 h毒力回归方程为Y=-0.1075+6.6851X,EC50值为5.81 mg/L,四羟甲基硫酸鏻持效期随浓度升高而延长;安全实验结果表明四羟甲基硫酸鏻对水体微生物表现抑制活性,对斑马鱼96h LCso值为76.61mg/L,低于国家规定的低毒标准;化学需氧量和生化需氧量分析结果表明,4.4 mg/L四羟甲基硫酸鏻为可生物降解,5.6~10 mg/L四羟甲基硫酸鏻较难生物降解。