建立同步细胞培养技术及检测不同状态酪氨酸酶活性方法研究中药单体对人正常黑素细胞功能的影响

来源 :中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yanghaibin123
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二十世纪末,Kubo等指出药物对不同状态的TYR影响也是不同的.要研究药物对TYR活性的影响,应观察药物对不同状态TYR的影响.为此,我们建立了蘑菇TYR多巴速率氧化法,并运用这一检测方法研究分析了5-MOP等中药单体对静息态(met)、活化态(oxy)蘑菇TYR的影响.MC、KC、FC是皮肤细胞的主要组成成分,它们具有不同的生物学功能,相互间又具有紧密不可分隔的联系和作用.它们的形态、结构和功能等变化都会引起皮肤发生相应的改变,所以体外培养MC、KC、FC已成为研究皮肤病病因、发病机理、药物作用机理的模型.我们吸取国内外和该实验室的经验,成功地建立了用同一皮肤标本同时培养MC、KC、FC的技术方法.并在此基础上,参考5-MOP等四种中药单体对不同状态蘑菇TYR的作用结果,研究分析了这四种中药单体对体外培养的MC的TYR活性和细胞增殖的影响.现将工作情况归纳如下:一、用同一皮肤标本同时培养、纯化人表皮正常MC、KC和FC;二、5-MOP、8-MOP、山柰素和芍药甙等中药单体对静息态(met)和活化态(oxy)蘑菇TYR活性的影响.为了深入探讨药物对不同状态TYR的作用和作用的靶点,我们建立运用了蘑菇TYR多巴速率氧化法,观测了5-MOP等四种中药单体对oxy-TYR和met-TYR活性的影响.三、5-MOP等对人正常黑素细胞的TYR活性和增殖的影响.在初步观察5-MOP等四种中药单体对蘑菇TYR活性影响的基础上,我们运用多巴氧化酶活性测定方法,进一步研究了5-MOP、山柰素对MC的TYR活性的影响.并运用MTT法观察了5-MOP、8-MOP、山柰素和芍药甙对MC增殖的影响.
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