论文部分内容阅读
一、视网膜神经节细胞定量分析 目的探讨视网膜神经节细(Retinal Ganglion Cells,RGCs)标记、铺片及图像计数方法.材料与方法12只SD大鼠依此进行:(1)双侧上丘两点法注射荧光金逆行标记RGCs;(2)定向铺片:标记4天后眼球固定、分离视网膜、定向平铺.距视乳头中心2mm上下鼻颞各拍摄照片一张,放大倍数125×.(3)图像分析:使用彩色颗粒分析软(Colour Pellet Analysis System, CPAS)做RGCs计数.结果RGCs计数:左眼474±33.7,右眼446±56.5;双眼无差异.结论经双侧上丘两点法荧光金逆行标记RGCs标记良好.二、大鼠视网膜神经节细胞损伤特点 目的探讨建立SD(SpragueDawley)大鼠视神经夹伤模型,研究大鼠RGCs丢失的特点.材料与方法14只大鼠随机分为2组,每组7只.右眼视神经夹伤,左眼作为正常对照眼,用夹持力40g的微型视神经夹于球后2mm夹持视神经60秒.术后24天双侧上丘两点法荧光金逆行标记.术后28天视网膜定向铺片及图像分析.将上下左右4张照片RGCs数量累加做为单眼RGCs相对密度(单位:个数/4标准区总面积),RGCs存活率=右眼RGCs相对密度/左眼RGCs相对密度×l00.对RGCs边界清楚的10只模型做左右眼RGCs面积(单位:像素)的比较.结论该实验模型可比性较强,RGCs损失以小细胞丢失为主.三、葛根素对视网膜神经节细胞保护作用 目的初步探讨葛根素对视神经夹伤后的视网膜神经节细胞保护作用材料与方法40只SD大鼠分5组,每组8只.A组:葛根素低剂量组(5mg/100g体重)、B组:葛根素中剂量组(10mg/100g体重)、C组:葛根素高剂量组(20mg/100g体重)、D组:阴性对照组(生理盐水)、E组:阳性对照组:莫尼定(0.1mg/100g体重).右眼视神经夹伤,左眼正常对照.与第二部分相似方法进行视神经夹伤、经上丘荧光金逆行标记、视网膜定向铺片、图像分析.结论该实验中葛根素中剂量组、高剂量组及莫尼定组对视神经损伤后的RGCs存活率有明显的增强作用.