穿心莲内酯对急性酒精性肝损伤保护作用的研究

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目的:1.评价穿心莲内酯(Andrographolide,AND,AD)对HepG2细胞的影响。2.评估穿心莲内酯对50%酒精诱导的SD大鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法:1.采用CCK-8法测定HepG2细胞增殖活力;采用流式细胞仪测定HepG2细胞的凋亡情况;采用Transwell实验检测穿心莲内酯对HepG2细胞迁移能力的影响。2.体重200±20g的健康SD大鼠60只,共分为6组:空白组、模型组、低浓度组、中浓度组、高浓度组和对照组。其中空白组和模型组采用1%CMC-Na处理;低浓度组采用1%CMC-Na和30 mg/kg穿心莲内酯处理;中浓度组采用1%CMC-Na和60 mg/kg穿心莲内酯处理;高浓度组采用1%CMC-Na和90 mg/kg穿心莲内酯处理;对照组采用37.8 mg/kg水飞蓟宾处理。各组均通过灌胃方式进行给药。3.除空白组外,各组均通过灌胃方式给予0.8 ml/100g的50%酒精,2次/天,连续7天。取大鼠肝脏和脾,称重,测定免疫器官指数;做肝组织HE病理切片并对其进行观察,检测肝脏TNF-α、IL-6、IL-1β、SOD、MDA含量和TNF-α、IL-6、IL-1β基因的mRNA水平;大鼠腹主动脉取血,测定血浆中TNF-α、IL-6、IL-1β以及AST、ALT、SOD、MDA的含量。结果:1.穿心莲内酯能抑制HepG2细胞的增殖活性,且具有时间依赖性和浓度依赖性;穿心莲内酯有促进HepG2细胞凋亡的作用;穿心莲内酯能降低HepG2细胞的迁移能力。2.穿心莲内酯对SD大鼠免疫器官指数的影响:各给药组与模型组相比较,肝指数均呈明显降低趋势,脾指数均呈明显升高趋势(P<0.05);穿心莲内酯对SD大鼠的肝脏和血浆中的TNF-α、IL-6、IL-1β水平的影响显示:与模型组相比,随着穿心莲内酯的剂量浓度增加,各给药组大鼠的肝脏和血浆中TNF-α、IL-6、IL-1β的水平均表现出显著下降的趋势(P<0.05);穿心莲内酯对SD大鼠的肝脏中的TNF-α、IL-6、IL-1β基因的mRNA水平的影响显示:与模型组相比较,随着穿心莲内酯的剂量浓度的增加,各给药组大鼠的肝脏中TNF-α、IL-6、IL-1β基因的mRNA水平均显著下降(P<0.05);穿心莲内酯对SD大鼠血浆中的AST、ALT水平的影响显示:与模型组相比较,随着穿心莲内酯的剂量浓度增加,各给药组大鼠血浆中AST、ALT水平均表现出显著下降的趋势(P<0.05);穿心莲内酯对SD大鼠的肝脏和血浆中的SOD、MDA水平的影响显示:与模型组相比较,随着穿心莲内酯的剂量浓度增加,各给药组大鼠的肝脏和血浆中SOD水平均显著升高,MDA水平均显著下降(P<0.05);穿心莲内酯对SD大鼠肝组织的病理结果的影响显示:各给药组的脂肪变性比模型组的脂肪变性要明显减少,且随穿心莲内酯浓度的升高而不断减少,高剂量几乎恢复至正常对照组的水平,以上可以说明穿心莲内酯有较好的改善酒精性肝损伤的效果。结论:1.穿心莲内酯可以抑制HepG2细胞的增殖活力、抑制HepG2细胞的迁移形成能力,并可促进HepG2细胞的凋亡。2.穿心莲内酯通过下调TNF-α、IL-6、IL-1β的水平以及降低AST、ALT、MDA水平、升高SOD水平来发挥保护酒精性肝损伤的作用。
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