中性粒细胞是一种重要的吞噬细胞,其被激活后产生大量的活性氧物质（Reactive Oxygen Species,ROS）,这些ROS通过氧化作用快速而高效的杀灭病原体,构成机体非特异性免疫的第一道防线。NADPH氧化酶是细胞内ROS的主要来源,它能将O₂还原成O₂^-,O₂^-经歧化作用生成H₂O₂。髓过氧化物酶（Myeloperoxidase,MPO）主要存在于中性粒细胞的胞浆颗粒中,能够催化H₂O₂与卤素反应生成氧化性更强的次卤酸,从而发挥抗微生物活性。刺激隐核虫（Cryptocaryon irritans）是一种危害极大的寄生性海水纤毛虫,给海水养殖业带来了巨大的经济损失。研究证实刺激隐核虫感染能够引起鱼类的免疫反应,但其具体机制有待进一步阐明。为了探究中性粒细胞是否参与斜带石斑鱼（Epinephelus coioides）抗刺激隐核虫感染的过程及其可能的机制,本文基于斜带石斑鱼的转录组数据,克隆了其吞噬细胞NADPH氧化酶复合体的5个亚基基因(gp91^phox、p22^phox、p67^phox、p47^phox、p40^phox)和MPO基因,并分析了这些基因在刺激隐核虫感染后的表达情况;此外,论文还表达了MPO部分区段,制备了兔抗斜带石斑鱼MPO多克隆抗体,通过检测刺激隐核虫感染后鳃组织中的MPO阳性细胞数,探究MPO阳性细胞的迁移和聚集情况。实验的主要结果如下:1.克隆得到了斜带石斑鱼gp91^phox、p22^phox、p67^phox、p47^phox、p40^phox和MPO共6个基因的开放阅读框（Open Reading Frame,ORF）序列,长度分别为1698 bp、564bp、1497 bp、1290 bp、1050 bp和2313 bp,分别编码565、187、498、429、349和770个氨基酸;进化分析表明它们与鱼类和哺乳动物的对应蛋白在进化上同源。2.定量分析显示:健康石斑鱼中,这6个基因在免疫相关组织中的表达量高于非免疫组织;刺激隐核虫感染后,这些基因的表达量在皮肤、鳃、脾脏和头肾等4个组织中均出现了不同程度的上调,提示这些基因可能参与了石斑鱼抗刺激隐核虫感染的过程。3.成功地表达了石斑鱼MPO部分序列,并以此为抗原免疫新西兰兔制备了兔抗石斑鱼MPO多克隆抗体,该抗体能够很好的识别石斑鱼天然MPO蛋白;利用该抗体进行免疫组化,发现刺激隐核虫感染后的鳃中,MPO阳性细胞数量显著增加,并在刺激隐核虫滋养体附近聚集,提示中性粒细胞参与了宿主抗刺激隐核虫感染的过程,并可能通过产生ROS杀伤滋养体。