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番茄（Solanum lycopersicum）是典型的呼吸跃变型果实，在后熟过程中发生了许多重要的生理变化。在激素水平上，伴随着乙烯的大量合成；在颜色转变上，叶绿素的降解和番茄红素的合成使番茄果实在外观上由绿转红；在果实质地上，由于水解酶的作用使果实逐渐软化。WRKY转录因子是植物特有的一类转录因子，已有的研究表明 WRKY转录因子在植物形态建成、物质代谢、生物及非生物胁迫响应等过程中发挥了重要的调控作用。近年来在拟南芥、水稻等模式植物上的研究已经表明 WRKY转录因子参与了对植物叶片衰老的调控，但对采后果实后熟调控方面的研究非常罕见。本论文在本课题组的研究基础上，以番茄为实验材料，分析了对乙烯产生明显响应的SlWRKY在叶片和果实中的表达模式、筛选其下游基因、验证与其互作的蛋白，从多方面进一步探讨了 WRKY转录因子是否参与了番茄果实后熟阶段的调控。主要研究结果如下： 1、采用荧光定量技术检测了9个 SlWRKY基因在四个发育时期的番茄叶片，六个自然成熟时期番茄果实中的实时表达情况。结果表明，（1）SlWRKY16、SlWRKY17、SlWRKY22、SlWRKY23、SlWRKY25、SlWRKY31、SlWRKY33、SlWRKY53、SlWRKY54都在叶片初始进入衰老状态时表达量最高，其中 SlWRKY25、SlWRKY33、SlWRKY54的变化幅度最大，相对幼叶的表达量升高了160-200倍；（2）SlWRKY16、SlWRKY17、SlWRKY22、SlWRKY23、SlWRKY25、SlWRKY31、SlWRKY33、SlWRKY53、SlWRKY54在番茄果实成熟期都有不同程度的上调表达，但具有不同的上调模式。（3）SlWRKY16、SlWRKY17、SlWRKY23、SlWRKY25表达量在粉红期出现峰值，SlWRKY31、SlWRKY33、SlWRKY53、SlWRKY54在全红期的表达量达到峰值。SlWRKY22的表达量则呈现逐渐上升的趋势。 2、使用荧光共聚焦显微镜观察融合YFP的重组载体在本氏烟草中的表达情况，结果表明：SlWRKY17、SlWRKY22、SlWRKY23、SlWRKY25、SlWRKY31、SlWRKY33、SlWRKY53、SlWRKY54均定位于细胞核。 3、将启动子活性载体和过表达载体共同转化烟草叶片，检测SlWRKYs对衰老相关基因启动子活性的影响，数据分析结果显示：SlWRKY对SlACO1、SlACO3、SlPAO的启动子活性没有产生明显影响；SlWRKY16、SlWRKY23、SlWRKY33、SlWRKY53使SlPPH启动子的提高了2-3倍，SlWRKY25使SlPDS的启动子活性上升了6倍。SlWRKY16、SlWRKY17也使SlPSY1的启动子活性有2-3倍的提高。SlWRKY16和SlWRKY17的共同作用则表现出对SlPSY1启动子更加强烈的调控作用，使其活性提高了接近4倍。 4、通过荧光双分子互补实验验证SlWRKYs与转录因子SlERF2b、SlERF7、SlRIN之间是否存在相互作用。结果表明，SlERF2b与 SlWRKY17、SlWRKY54，SlERF7与 SlWRKY17、SlWRKY33，SlRIN与 SlWRKY17、SlWRKY53、SlWRKY17与SlWRKY16、SlWRKY54之间均存在蛋白水平的互作关系。 5、对SlWRKY23、SlWRKY53进行原核表达，并纯化获得高纯度的蛋白。这些蛋白在体外与包含W-box的核酸探针反应，结果显示SlWRKY23能够与SlACO1、SlACO2、SlACO3、SlPAO、SlPDS、SlPG、SlPPH、SlPSY1、SlSGR的启动子探针发生体外结合，而SlWRKY53未发现与上述其中一探针的结合。