论文部分内容阅读
采用水提醇沉法从黄桃果肉中提取出水溶性粗多糖，利用正交试验确定了最佳提取工艺条件：浸提温度90℃、液固比（v／w）2：1、浸提时间3h。粗多糖为黄褐色粉末，难溶于冷水，可溶于热水、稀酸、稀碱，不溶于乙醇、丙酮、乙醚、正丁醇等有机溶剂，粘度较大。黄桃水溶性粗多糖经测定，其各组分含量分别为中性多糖60％，酸性多糖36.97％，蛋白质0.91％，水分1.37％。过氧化氢氧化法除去色素后，为纯白色，7次Sevag法除蛋白，蛋白质含量为0.13％。经DEAE-Sepharose离子柱层析得到两个组分，分别出现在水洗脱部分和盐洗脱部分，收集相同峰位组分，减压浓缩后，蒸馏水透析48 h，冷冻干燥得纯白色多糖HTP1和HTP2。样品HTP1和HTP2经SephacrylS-300凝胶柱层析，均为单一对称峰。经HPSEC鉴定HTP1为单一组分，分子量为52107，HTP2也为单一组分，分子量为59855。乌式粘度计测定特性粘度HTP1为13.83ml／g，HTP2为37.16ml／g。HTP1和HTP2分别经完全酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、紫外光谱、红外光谱和核磁共振图谱分析。HTP1主要单糖组成为D-Glc、D- Gal、D- Arb和L- Rha，摩尔比为D-Glc：D-Gal：D-Arb：L-Rha=1.0：4.2：14.5：1.5，主链为α（1→3）键连接的阿拉伯半乳糖，有部分1→6键分支。HTP2主要单糖组成为D-GalA、D-Gal、D-Man，摩尔比为D-GalA：D-Gal：D-Man=34.3：5：1，主链为α（1→3）键连接的半乳糖醛酸。 本实验同时考察了粗多糖和HTP对有害菌的抑制作用，发现粗多糖对大肠杆菌、黑曲霉和扩展青霉都有一定的抑制作用，尤其是对黑曲霉的抑制尤为明显；而HTP只对大肠杆菌有抑制作用，对黑曲霉和扩展青霉没有抑制作用。本实验研究结果表明，HTP1对羟基自由基（·OH）和超氧阴离子自由基（O2-）均有一定清除作用，其IC50分别为2.87 mg／ml和401.3μg／ml。HTP2对·OH的清除能力远远大于HTP1，其IC50为270.92μg／ml。但对O2-却无任何清除作用。HTP1和HTP2各分别以100mg／kg、200mg／kg剂量经腹腔注射，连续10d对足趾皮下接种Lewis肺癌的小鼠给药，同时以环磷酸胺作为抗肿瘤阳性对照、云芝多糖作为提高免疫力阳性对照、等体积的生理盐水作为阴性对照。末次给药后处死小鼠，截取小鼠足趾，计算抑瘤率分别为54.69%、43.44%及47.08%、44.48%。其中HTPI高剂量组的抗肿瘤疗效较HTPZ高剂量组更为明显。HTPI和HTPZ均能明显提高NK细胞活性，且活性提高均在47%以上，与云芝多糖52%的提高率相差不大，但与阴性对照相比差异均达极显著水平（P<0.01）。同时对荷瘤小鼠的淋巴细胞转化的活性也具有一定的促进和提高，HTPI和HTPZ的高剂量组与低剂量组的刺激指数相差不大，均在1 .70一1.74之间，无显著差异，低于阳性对照云芝多糖（1.83），但与阴性对照组相比，差异达极显著水平（P<0.01）。说明黄桃水溶性多糖能明显促进淋巴细胞的转化。