南海部分海洋沉积物真菌多样性及可培养真菌抗菌和产酶活性初步研究

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随着人们对海洋资源的开发利用,海洋微生物的重要性越来越受关注,真菌作为微生物中的一个主要类群,同样成为研究的热点之一。但是,目前关于海洋沉积物环境中的真菌多样性的研究还较少。为了研究南海深海来源沉积物的真菌多样性,本研究结合传统培养方法和Illumina高通量测序,研究南海4个站位(每个站位3个深度)沉积物样本中真菌的群落结构组成。通过高通量测序,本研究共得到1272个OTUs,测序结果中有387个OTUs与数据库中已知真菌的相似度低(unidentified),提示这些沉积物中存在未知的真菌类群。在分离培养真菌时,总共使用了8种培养基以及4种不同的培养方法,总计从沉积物中分离到125株纯化的真菌菌株,通过形态学观察结合ITS基因测序分析,排重后一共得到18株真菌代表种。因为海洋环境的特殊性,海洋来源的微生物已成为研究新的活性物质(化合物、酶等)的重要资源。本研究采用滤纸片扩散法和生长速率法,对从沉积物中分离培养到的真菌测定了其发酵液粗浸膏的抑菌活性,初探其产活性物质的潜能。结果显示有10株真菌的粗浸膏表现出抗细菌活性,尤其是Alternaria tenuissima(DN09)、Penicillium chrysogenum(DN16)和Alternaria alternata(DN14)对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌均表现出抑制作用,但是未检测到有抗真菌活性。同时,本研究对培养到的真菌,采用透明圈法测定了其产蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、几丁质酶、纤维素酶和壳聚糖酶的潜能。平板初筛呈阳性的菌株,采用液体复筛的方法,进一步测定其发酵液的粗酶活,同时探究温度对粗酶活的影响。结果表明,一共筛选到6种产蛋白酶的真菌,11种产淀粉酶的真菌和6种产脂肪酶的真菌。本研究将高通量测序和传统培养方法相结合,研究南海深海沉积物真菌群落组成,揭示了南海沉积物中蕴含丰富的真菌资源。不仅增加了对南海深海沉积物中真菌多样性的认识,同时,多种来自沉积物的可培养真菌有产抗菌物质和酶的潜能,本研究为后续深海真菌开发利用奠定了基础。
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