研究目的：子痫前期是孕产妇和围产儿发病及死亡的重要原因。对其发病机制的研究一直是产科关注的热点。以人白细胞相关性抗原-G（HLA-G）表达下降为代表的免疫学说是子痫前期的经典病因，而以过氧化氢（H₂O₂）水平升高为特点的氧化应激学说亦是近年来其发病机制的重大进展，二者有无相关性，是否有潜在因果联系尚不明确。本研究将从分子生物学，细胞生物学等方面进一步探究：子痫前期胎盘和血清中过度氧化应激与滋养细胞上HLA-G表达有无相关性及表达HLA-G阳性的滋养细胞是否更容易受到氧化应激损伤。研究方法：1.（1）选择2008年10月-2009年10月南京医科大学第一附属医院住院产妇60例，其中正常妊娠组和子痫前期组各30例。采用比色法检测子痫前期和正常妊娠组胎盘组织中H₂O₂水平；采用免疫组化、Western Blot检测两组胎盘组织中HLA-G蛋白的表达水平；并对胎盘组织中H₂O₂水平与HLA-G蛋白表达水平进行相关性分析。（2）H₂O₂干预0h、24h、48h后，免疫荧光法和Western Blot分析滋养细胞株HTR-8/SVneo上HLA-G表达量变化。2.（1）选择2010年6月-2010年12月南京医科大学第一附属医院发生重度子痫前期住院分娩产妇30例，其中早发型子痫前期组及晚发型子痫前期组各15例；选择门诊建卡晚孕产检的正常孕妇15例。采用比色法检测早发型子痫前期、晚发型子痫前期和正常妊娠组血清中H₂O₂水平；采用ELISA法检测三组孕妇血清中sHLA-G蛋白的表达水平；并对三组孕妇血清中H₂O₂水平与sHLA-G蛋白表达水平进行相关性分析（。2）H₂O₂干预0h、24h、48h后，ELISA法分析HTR-8/SVneo细胞上清中sHLA-G表达量变化。3.（1） HLA-G siRNA和control siRNA寡聚核苷酸转染滋养细胞株HTR-8/SVneo，并采用Western Blot和RT-PCR验证干扰效果。（2）H₂O₂干预后，采用MTT法检测转染细胞的增殖能力；流式检测转染细胞的凋亡率；Transwell实验检测转染细胞的侵袭能力；明胶酶谱检测转染细胞侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9的活性改变。研究结果：1.（1）和正常产妇相比，子痫前期产妇胎盘组织中H₂O₂含量呈高表达，HLA-G蛋白呈低表达，并且H₂O₂含量和HLA-G的表达量呈负相关；（2）H₂O₂干预HTR-8/SVneo细胞后，干预组HLA-G蛋白表达量明显低于空白组，并且随着时间的延长而降低；荧光显微镜显示，干预组细胞中HLA-G表达强度亦明显弱于对照组。2.（2）正常妊娠组、晚发型及早发型重度子痫前期孕妇血清中H₂O₂含量逐渐升高，sHLA-G蛋白表达量逐渐降低，并且H₂O₂含量和sHLA-G蛋白表达量呈负相关（2）H₂O₂干预HTR-8/SVneo细胞0h、24h、48h后，干预组sHLA-G分泌量明显低于空白组，并且随着时间的延长而降低。3. H₂O₂干预后，和HLA-G siRNA组相比，control siRNA组细胞的增殖抑制率和凋亡率增高，侵袭能力和侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9的活性明显下降。研究结论：1.子痫前期中，高水平的H₂O₂会下调滋养细胞上HLA-G（包括sHLA-G）的表达。2.表达HLA-G的滋养细胞更容易受到氧化应激损伤。